Каскад классический: Стрижка Каскад 👧 Различные варианты прически

Стрижка Каскад 👧 Различные варианты прически

Содержание:

1. Происхождение стрижки Каскад.
2. Классический Каскад.
3. Градуированный Каскад.
4. Рваный Каскад.
5. Каскад на длинные волосы.
6. Каскад на средние волосы.
7. Каскад на короткие волосы.
8. Стрижка Каскад с челкой.
9. Стрижка Каскад без челки.
10. Отличие Каскада от подобных стрижек.

ПРОИСХОЖДЕНИЕ СТРИЖКИ КАСКАД

Своим появлением стрижка каскад обязана известному британскому парикмахеру Видал Сассуну. Именно он в начале семидесятых годов ХХ столетия, когда в моде доминировал панк стиль с его неаккуратными, рванными и неопрятными прическами, предложил несколько облагородить и сделать более женственным модный образ и представил миру классический вариант стрижки каскад. Данная стрижка быстро вытеснила, поднадоевшие к тому времени, модницам начесы. Каскадные стрижки до сих пор являются актуальными и самыми востребованными, которые по праву завоевали сердца женщин во всем мире своим разнообразием и простотой исполнения.

КЛАССИЧЕСКИЙ КАСКАД

Классическая стрижка каскад выполняется на волосы средней длины, а также на длинные. При классическом каскаде волосы стригут несколькими слоями разной длины начиная от макушки. Благодаря плавным переходам между уровнями прическа получает дополнительный объем. Стрижка оптимальна для прямых и едва волнистых локонов. Классический каскад – это плавная стрижка без заметных переходов и видимых границ между прядями различной длины.

ГРАДУИРОВАННЫЙ КАСКАД

Градуированный Каскад — пряди состригают под определенным углом, отделяя для моделирования контуров тонкие слои волос. На длинных локанах верхний уровень почти всегда выглядит как шапочка, если хотите максимально сохранить длину по форме прически, имейте это в виду.

РВАНЫЙ КАСКАД

Рваный Каскад — это дерзкий, смелый и особо креативный вариант. Для создания эффекта небрежной прически используется острая филировочная бритва или ножницы. Такую стрижку можно выбирать женщинам с треугольной формой лица, а на остальных данная стрижка будет смотреться также естественно, но не так выразительно.

КАСКАД НА ДЛИННЫЕ ВОЛОСЫ

Длинные волосы во все времена считались настоящим достоиноством и богатством любой женщины. Так и стрижка Каскад не зря нашла свое особое место среди причесок, которые сохраняют не только длину волос, но и подчеркивает особые достоинства обладательниц роскошных волос.

Женская стрижка на длинные волосы VOLUME TOP | Модные стрижки 2020 Каскад

КАСКАД НА СРЕДНИЕ ВОЛОСЫ

КАСКАД НА КОРОТКИЕ ВОЛОСЫ

Стрижка каскад является универсальной стрижкой, которая отлично подойдет вам на короткие волосы. Такая стрижка не требует много ухода, а также очень проста в укладке. Каскад на короткие волосы идеален для обладателей привлекательной внешности, не требующей сильной коррекции. Укороченные пряди, обрамляющие лицо, подчеркивают форму овала, черты. Оптимальным вариантом станет овальное, треугольное, узкое, вытянутое лицо.

Короткий каскад также подойдет обладателям круглого, квадратного овала с минимальной выраженностью грузных линий.

СТРИЖКА КАСКАД С ЧЕЛКОЙ

В основном стрижка каскад предполагает наличие челки, но здесь уже по желанию. С помощью челки еще легче будет корректировать форму лица, придавая ему нужный вид. Косая, рваная, градуированная, либо длинная челка будет отличным выбором под многослойную стрижку Каскад.

СТРИЖКА КАСКАД БЕЗ ЧЕЛКИ

Каскад без челки может подойти почти каждой женщине и девушке, но при этом есть некоторые ньюансы. Выбор зависит от типа лица и волос, поэтому следует знать особенности и правила подбора для этой стрижки. Если у вас круглое лицо, то стрижка каскад без челки — идеальная стрижка. Только обязательно стоит профилировать волосы, что поможет в дальнейшем создать более привлекательный образ.

ОТЛИЧИЕ КАСКАДА ОТ ПОДОБНЫХ СТРИЖЕК

Проблема выбора всегда самая сложная задача. Это актуально и при определении подходящей модели стрижки. Каскад и Лесенка внешне похожи. Несмотря на общие черты, модели обладают массой различий, которые позволяют уверенно определить название стрижки. Явным различием вариантов выступает принцип формирования слоистой структуры. В Лесенке ступенчатость затрагивает только контур, в Каскаде — весь объем.

Также нередко путают стрижку Аврора с очень похожей на нее прической Каскад. Действительно, эти два варианта женских стрижек имеют немалое сходство. Однако они все же являются разными прическами, имеющими свои характерные особенности. Обе эти стрижки имеют характерные перепады в длине и отличаются многоуровневой структурой и наличием рваных прядей.

Главное отличие в том, что стрижка Аврора на короткие, средние или даже длинные волосы имеет более резкие перепады длины. На макушке волосы стригут совсем коротко, благодаря чему создается так называемая «шапочка» вокруг головы (у Каскада ее нет). Остальные же пряди отличаются своими рваными и динамичными линиями. Стрижка Каскад, в отличие от Авроры, имеет гораздо более плавные контуры и переходы длины. Но обе эти прически по-своему хороши и имеют право на существование.

Стрижка слоями на среднюю длину («Лесенка», «Каскад»)

Каскад на средние волосы. Фото 2021: классический, градуированный, рваный, двойной, удлиненный, асимметричный, как выглядит с челкой и без

Волосы средней длины легко преобразить посредством прически каскад, выполненной настоящим профессионалом. В нынешнем сезоне любимая многими стрижка находится на пике популярности. Кроме того, с помощью каскада можно подчеркнуть выгодные черты внешности, а также скрыть некоторые недостатки.

Модные тенденции в прическе каскад

В тренде 2021 года прическа асимметричный каскад. На средних по длине волосах возможности этой стрижки позволяют не только создать модный, неповторимый образ, но и делать вариации прически и укладки. Опытный мастер подберёт наиболее эффектные параметры, скорректирует пробор, в случае одобрения клиента создаст также асимметричную чёлку, которая снова популярна.

Современные модные тенденции на примере стрижки каскад гармонично вписываются в повседневность, и позволяют особам женского пола раскрыть свою индивидуальность без особых временных затрат и изощрённых усилий. Креативная асимметрия придаст облику новизны и оригинальности, а необычно подстриженная чёлка моложавости и характерности.

Кому подходит стрижка каскад

Независимо от типа внешности, стрижка каскад будет к лицу любой девушке и женщине. В случае, когда волосы лишены объёма и тонкие по структуре, данная причёска позволит разрешить ситуацию и иллюзорно придаст локонам пышность, а также упростить ежедневную укладку. Часто каскад делают на детских волосах, которые по своей природе мягкие и тонкие.

Виды каскадной стрижки

Разнообразие вариаций прически каскад предполагает возможность подбора идеальной модели стрижки на средних волосах, исходя из особенностей внешности и предпочтений клиента.

Классический каскад

Представляет собою стрижку лесенкой, в которой формируются пряди разной длины по мере удаления от макушки головы до затылка. Но, в отличие от стандартной лесенки, в каскаде пряди оформляются чётче.

Кроме того, исполнение классического каскада представляет собой послойное состригание локонов от линии шеи. Варианты, где точка отсчёта находится выше или ниже являются уже отклонением от классики.

С многоступенчатой филировкой

Филировка, выполненная в виде множества ступеней, добавляет стрижке выразительности и объёма. Волосы далее при любом типе укладки будут выглядеть естественно, легко и подвижно.

Эта техника выручает обладательниц излишне густых локонов, уменьшая тяжесть общей массы волос и создавая лёгкость и эфемерность прядей.

Градуированный каскад

Градиент – это череда плавных и резких переходов, которые образуются за счёт контрастно укороченных волос сверху и слоёв разной длины, ниспадающих к затылочной части головы.

Рваный каскад

Создание дерзкого образа предполагает именно этот вид каскада. Намеренно переходы между ступенями делаются подчёркнуто заметными и контрастными, что можно дополнить соответствующим окрашиванием прядей.

Двойной каскад

Каждый слой волос в рамках двойного каскада срезается вдоль всей окружности головы, образуя чёткие линии и прикорневой объём.

Особенно подходит такая техника девушкам с тонкими волосами, так как придает дополнительный объем прическе.

Удлиненный каскад

Прическа каскад на средние волосы в удлинённом варианте особенно эффектна, если пряди вьются. В этом случае стрижка держит форму и не требует дополнительных усилий по укладке.

Асимметричный каскад

Разная длина волос относительно правой и левой сторон лица характеризует этот вид каскада. В сочетании с креативной укладкой и покраской асимметрия в каскаде добавит экстравагантности и очарования облику.

Каскад с челкой и без челки

Причёска каскад на средние волосы удачно дополняется чёлкой.  Учитывая пожелания клиента, форму лица и структуру волос, стилист подберёт нужную вариацию: рваную, короткую, асимметричную или удлинённую. Причём, рваная чёлка является трендом текущего сезона.

Особам женского пола, чьи волосы сильно завиваются и имеют жёсткую структуру, нежелательно экспериментировать с чёлкой, так как ежедневная укладка данного элемента причёски в этом случае будет проблематична.

Филировка стрижки каскад

Многогранно каскадная причёска выглядит с лёгкой филировкой, которую применяют по всей поверхности волос. Благодаря этой технике стрижка приобретёт иллюзорную лёгкость, пряди будут нежно обрамлять лицо, что придаст моложавости и подчеркнёт нежные черты.

Особенности каскада для разных типов лица

Каскадная стрижка на волнистые волосы

Причёска каскад на средние волосы вьющегося типа призвана облегчить выполнение укладки и в целом ежедневный уход на всех этапах. Дело в том, что этот тип волос характеризуется как непослушный, склонный к спутыванию и, соответственно, сложностью в расчёсывании.

Завитки могут выглядеть хаотично и неопрятно, что легко исправляется стрижкой каскад, в ходе выполнения которой мастер проредит объём и создаст эффект упорядоченных локонов.

Стрижка каскад для мягких и тонких волос

Мастерски созданная каскадная причёска освободит волосы этого типа от посечённых концов без утраты длины. Переходы между уровнями среза прядей делаются плавными без резких акцентов, что зрительно способствует увеличению объёма.

Каскад для густых волос

Густые локоны также будут аккуратно смотреться в распущенном виде, если парикмахер применит к ним одну из разновидностей каскада. Также эта причёска облегчит восприятие черт лица и позволит визуально сбросить лишние годы.

Окрашивание волос при стрижке каскад

Посредством процедуры окрашивания можно усилить акценты, которые мастер расставил в ходе создания причёски, сделать образ более стильным и индивидуальным.

Варианты окрашивания:

1. Отдельные пряди в шахматном порядке выделяются светлым тоном. Переход цвета за счёт дополнительного тонирования получается плавным и естественным.
2. Омбре. Этот модный тип окрашивания предполагает равномерное окрашивание волос в два близких по цвету тона, постепенно переходящих один в другой.
3. Брондирование. В отличие от предыдущего вида при этом окрашивании тона, число которых может равняться трём, выбираются более контрастные. Причём на причёске каскад оно смотрится особенно эффектно.
4. Шатуш. Мастер стремится создать иллюзию естественным образом выгоревших под солнцем волос, что наиболее удаётся на светлых от природы локонах.

Как укладывать каскад

Дополнительным преимуществом данной стрижки являются множественные вариации в укладке. Простота в технике выполнения обеспечивает возможность ежедневно менять образ в зависимости от настроения.

В качестве повседневного способа можно рассмотреть:

• посредством фена приподнимаются волосы на макушке;
• начёсывая и сбрызгивая локоны лаком, можно обеспечить долговременный эффект;
• концы прядей завиваются утюжком в желаемом направлении.

Прически на каскад средней длины

Существуют различные варианты укладки этого вида стрижки, которые применимы в домашних условиях:

Кому не подходит стрижка каскад

На удлинённых волосах с мелкими кудрями данная стрижка может выглядеть неестественно, если ступени выделить чёткими акцентами. Если же выполнить технику каскада стандартным классическим для этой стрижки способом, то обработанные пряди не будут видны в общей массе волос.

При особенно густых локонах могут быть сложности в последующем поддержании нужной формы причёски. Выходом из такой ситуации может быть асимметричный каскад с акцентированными концами прядей, подчёркнутыми посредством окрашивания.

Достоинства и недостатки каскада на средние волосы

Можно обозначит целый ряд причин, побуждающих выбрать данную стрижку:

• универсальность относительно типов внешности и структуры волос;
• актуальность не зависимо от времени суток и обстоятельств;
• выгодные характеристики формы: добавление объёма, акцентов и густоты;
• лёгкость укладки: оптимальный набор инструментов, имеющихся в каждом доме; и сопутствующих косметических средств;
• многогранность. Меняя отдельные элементы причёски, например, подкручивая локоны в разном направлении, можно основательно влиять на восприятие образа в целом.

Каскад, выполняемый опытным стилистом, может быть универсальным инструментом для коррекции черт лица и расставления выгодных акцентов.

Среди негативных нюансов причёски каскад выделяются следующие:

• в целях отращивания волос эта стрижка не уместна, так как для выравнивания длины потратится дополнительное время;
• активный образ жизни, при котором волосы не должны создавать помех, не особо сочетается с этим типом стрижки, так как будет достаточно сложно без помощи дополнительных аксессуаров зафиксировать все пряди статично;
• если волосы сильно повреждены по всей длине, данная причёска подчеркнёт несовершенства;
• форма каскада поддерживается посредством регулярных походов к парикмахеру;
• предельной осторожности требует выполнение данной техники на очень густых волосах, так как создание чрезмерного объёма может вызвать проблемы с укладкой.

Прическа каскад на средних волосах предполагает наличие высокой квалификации парикмахера-стилиста. Чувство вкуса, меры и опыт помогут специалисту подобрать наиболее оптимальный вариант, подходящий конкретному клиенту и облегчающий выполнение ежедневной процедуры укладки. Правильно расставленные акценты не только подчеркнут индивидуальность, но и скорректируют недостатки внешности.

Видео о прическе каскад на средние волосы

Как выглядит каскад с челкой и без на средних волосах:

Порядок выполнения стрижки каскад на средние волосы:

Каскад на средние волосы с челкой: красивые варианты с фото

Стрижка каскад – популярное веяние моды. Мода хранит полную копилку классических вариантов причесок для девушек и женщин разного возраста. Стрижка каскад на средние волосы подходит дамам, которые стремятся оставаться стильными при любых обстоятельствах. Красота и современность – в каждом штрихе прически.

Каскад на средние волосы может быть самым разнообразным. Достаточно проявит фантазию – и готов новый образ, полный великолепия.

Мода призвана подчеркивать индивидуальность каждой модницы. Женственная, дерзкая, естественная и романтичная натура найдет в этой стрижке свою прелесть.

Ухоженные волосы средней длины – атрибут динамичных женщин.  Роль женщины претерпела изменения: хозяйка, бизнес леди, мама и просто женщина. Средняя длина – модное украшение дам, которое не потеряет актуальности никогда.

Каскад с чёлкой придаст романтичности и загадочности его обладательнице.

Челка – деталь прически, которая всегда актуальна, такой образ наполняется молодостью и энергичностью.

Прическа, декорированная челкой, подчеркнет преимущества шевелюры, густой и роскошной. Для тонких — каскад станет вариантом прически, придающим дополнительный объем. Нет никаких ограничений по возрасту: девушки и женщины разных возрастов будут комфортно чувствовать себя с такой прической. Каскад – прическа простая в уходе, достаточно подсушить и уложить ее при помощи фена – и все! Челка смягчает мимику, а пряди, идущие у зоны лица, постепенно увеличиваясь у шеи, смягчают геометрию тела.

Челка

Чёлка является интересным элементом прически: кто-то с ее помощью спасается от видимых недостатков, а кто – то приобретает много хлопот (локоны вьются). Челка может быть разной длины, выбор определяет форма лица и предпочтения клиента.

Типы челок по форме лица:

• косая и асимметричная челка украсит круглолицых дам,
• прямая и густая челка подойдет женщинам с лицом длинной и узкой формы.

Этот тип прически прекрасно подходит женщинам с густыми и тонкими, прямыми и вьющимися шевелюрами.

Особенности волос

• Густые. Густые средние по длине волосы станут более привлекательными в обрамлении каскадной стрижки. Никакого утяжеления и длительного времени на укладку. Косая челка украсит образ, градуированные концы, создают эффект многослойности. В результате получен экстравагантный и загадочный образ.
• Тонкие. Средние волосы с небольшим объемом – интересный материал для профессионала, так как нужно придать прическе изящную форму. Челка сместит основной акцент на черты лица. Средние волосы больше не прилипают к голове. Здоровьем и силой наполнен каждый штрих стрижки. Тонкой шевелюре можно добавить объема при помощи стрижки.
• Вьющиеся. Средние волосы с вьющейся фактурой нуждаются в правильной окантовке: водопад на голове смотрится игриво и невероятно красиво. Дамам с такими волосами нужно доверять только мастерам с многолетней практикой.

Виды каскада

Каскадные стрижки помогают легко и быстро меняться. Густая челка по брови гармонично дополняет прическу в случае вытянутой формы лица клиента; для круглого лица – косая челка. Если лоб выразительный, то стоит немного прикрыть его при помощи челки.

В индустрии моды принято различать следующие типы каскада: классика, рваный, асимметрия, градуировка.

Классический

Если необходимо создать грациозный образ, то можно побаловать себя выбором каскадной прически. Плавные лини и границы придают образу завершённость и объемность. Косая челка немного разбавляет строгость геометрии прически. Такая прическа актуальна в повседневной стилистике и деловом стиле. Русые тона заиграют новыми красками в таком фактурном соответствии.

Рваный

Смелые дамы, полные жизненных сил, легко примерят каскад с челкой рваной формы. Верхние пряди не похожи на нижние: длина заметно отличается. В этом секрет успеха прически, челка неправильной геометрии подчеркнет ваши глаза.

Рваная каскадная стрижка способствует коррекции формы скул, геометрия лица приобретает правильные формы. Можно менять окантовку – и получать новые образы.

Асимметрия

Многослойность прически обеспечена симметричными линиями. Косая или асимметричная челка идеально завершит образ. Асимметрия требует ежедневной укладки. Декор:

• расположение прядей на разных уровнях,
• выбритая височная зона.

Выпрямленные утюжком волосы раскроют всю красоту асимметричной стрижки. Добиться неожиданного решения можно при помощи интересного декора.

Каскад на средние волосы может быть самым разнообразным. Достаточно проявит фантазию – и готов новый образ, полный великолепия.

Градуировка

Отличие от классического каскада состоит в расположении концов, увеличивающихся в разных местах по длине, друг над другом. Правильность овалу лица придаст челка. Больше всего этому варианту уделяют внимание обладательницы волнистых волос. Дамы с волнистой шевелюрой не смогут удержаться от такого преображения. Можно применить декор цветом.

Важно сделать правильный выбор прически, чтобы радоваться каждому дню.

Как правильно делать укладку

Укладка каскада на средние волосы требует внимательного отношения к форме лица.

• Овал – правильные черты лица могут быть обрамлены любой прической.
• Круглолицые дамы будут очаровательны с челкой. При укладке располагать пряди внутрь.
• Квадратный тип нуждается в декоре в виде рваной челки. Таким образом достигается правильность линий мимики.
• Для укладки понадобится фен и круглая расческа.
• Креативные укладки можно сделать при помощи мокрого эффекта, выпрямления при помощи утюжка.
• Сделать образ загадочным поможет верная укладка.

Каскад на среднюю длину требует тщательного ухода за внешним состоянием волос.

Ухоженные и здоровые волосы – гордость модниц и предмет внимания окружающих. Челку можно выбирать в соответствии с формой лица или желанием клиента.

Советы профессионалов

• При выборе прически на средние волосы руководствоваться советами опытных специалистов.
• Ухаживать за волосами регулярно: использовать маски, масла и спреи. Добавить правильный рацион.
• Использовать проверенные средства для укладки.
• Тонкие волосы нуждаются в объеме и густоте, а густые – в легкости и пышности.
• Каскад на средние волосы украсит обладательниц русых оттенков волос.
• Светлые тона: объем и сияние волос.
• Регулярно стричь кончики, иначе прическа приобретет неряшливый вид, а волосы потускнеют.
• Каскад на среднюю длину волос украсит дам, чье лицо имеет форму овала. Женщинам с узким лбом желательно выбирать косую или асимметричную прическу и челку.
• Широкие скулы, пухлые щеки – эти особенности формы лица легко обернут в достоинства внешности при правильном выборе прически и формы челки.

Прическа определяет поведение дам, их настроение, поэтому каскад на средние волосы подчеркнет особенности натуры и добавит настроения каждому дню. Чтобы быть красивой не обязательно приобретать много разной одежды, можно просто менять прическу или форму челки: от прямой до косой. Прическа способна сделать жизнь женщины яркой и насыщенной событиями.

Стрижка каскад на средние волосы + фото

Стрижка каскад на средние волосы стала пиком популярности в конце прошло года и уверенно перешагнула в наступивший. Подстричь волосы таким способом стремятся все, кто желает зрительно увеличить их объем, придать шевелюре красивый вид. Всего несколько штрихов в укладке, игра с челкой – и стильная прическа на прямые, кудрявые либо вьющиеся от природы локоны готова. 

Преимущества каскадной стрижки

Стрижка каскад на волосы длиной до плеч привлекает женщин за то, что на ее основе в домашних условиях можно легко сделать повседневные, красивые романтические и вечерние прически.

Аккуратная сборка длинной части волос в жгут или милый хвостик с заколкой на макушке способна оживить привычный вид. Если утром не осталось времени на укладку, то можно просто сделать косой пробор и стрижка заиграет по-новому.

Любительницы пышных укладок могут создать дополнительный начес своими руками, придавая верхней части прически желаемый результат.

Каскад на средние волосы подходит для женщин, которых природа наделила следующей формой лица:

• круглой;
• овальной;
• в виде прямоугольника;
• слишком вытянутой.

Модные варианты каскада делают почти любую форму лица овальной, молодят тех, кому за тридцать. При этом мастер может сделать стрижку любой длины, варьируя ее из месяца в месяц.

Густые пряди станут более легкими и податливыми после стрижки. Градуированный верх придаст шевелюре нежности. Кудрявые локоны будут легко укладываться в домашних условиях без специальных фиксирующих средств. 

Особенности каскада

Модный каскад имеет свои особенности исполнения — это каскадное срезание прядей поэтапно от макушки по направлению к кончикам. Он может быть двойной, тройной или состоять из множества слоев. Количество ступеней зависит от длины волос, от того, насколько они тонкие и какую имеют структуру. 

Особая техника выполнения прически позволяет сделать тонкие волосы зрительно густыми.  Раньше женская стрижка выполнялась на шевелюре длиной до плеч либо ниже. Теперь стилисты делают каскад и на коротких прядях, придавая им импозантный вид. Обычно на тонкие волосы делают длинные ступени, явно демонстрирующие переход от слоя к слою. Густые локоны оформляют частой лесенкой. 

Варианты укладки и правила ухода

Укладка стрижки слоями своими руками будет зависеть от исходной длины первого слоя, который может начинаться выше линии уха. В этом случае косой пробор придаст каскаду некую пикантность. Классический вариант можно слегка подкрутить сзади, если от природы волосы прямые. Вьющиеся локоны до плеч наоборот следует выпрямить утюжком, чтобы получить интересную прическу.

Что касается ухода в домашних условиях, то он должен быть особенно тщательным. Даже слегка посеченные кончики в корне испортят весь вид прически. Мыть локоны рекомендуется шампунем для придания объема. 

Вьющиеся кудряшки обрабатывать специальным средством для мытья. Завершать уход следует путем нанесения ухаживающего бальзама.

На тонкие волосы перед укладкой допустимо наносить немного мусса. Свободные пряди сзади не следует трогать, особенно если они ниже линии плеч. Сушить прическу желательно холодным воздухом.

Волосы, не вьющиеся от природы, мастер обычно укладывает с помощью насадки диффузор. Такая техника вполне подвластна любой женщине, умеющей держать в руках фен.

С длинной и не очень челкой также можно поиграть, чтобы сделать прическу оригинальной. Техника укладки будет варьироваться от того, какой результат следует получить. Можно накрутить ее на бигуди либо плойку, особенно если волосы тонкие, можно выпрямить.

Вьющиеся передние волосы и классический костюм будут сочетаться, если выпрямить их утюжком и пригладить воском для волос. Сзади при этом можно заколоть красивую заколку. 

Двойной эффект от стрижки слоями можно получить накрутив верхнюю часть и выпрямив нижнюю, особенно сзади. 

Вечерние укладки мастер в салоне делает разными способами. Красиво смотрится каскад, уложенный с помощью геля «Мокрый эффект», особенно если волосы кудрявые. Их достаточно вымыть и нанести специальный состав. Вьющиеся локоны также будут смотреться торжественно, если их обработать подобным способом. 

Модные варианты получаются, если верхний ярус уложить на косой пробор. Двойной способ укладки советуем использовать сзади. Для этого один слой под шапочкой завейте к голове, в самый нижний ярус наружу либо наоборот. 

Преобразить прическу можно рваной челкой. Стрижку длиной до плеч парикмахер на праздник может преобразить с помощью модной покраски.

Когда не стоит делать стрижку каскад

Рассмотрим случаи, когда стоит отказаться от данной стрижки:

1. Если женщина хочет сделать классический каскад, чтобы получить модный в этом сезоне объем, то следует приготовиться к тому, что каждое утро придется делать укладку. Отказаться от ежедневного ухода смогут только женщины, имеющие густые от природы волосы. 
2. Особы, желающие отрастить волосы, также должны выбрать иной вариант стрижки, так как даже плавный скачок между слоями не позволит локонам равномерно отрастать. Двойной переход между шапочкой и нижней шевелюрой будет отрастать несколько лет.
3. Делать разнообразные прически из каскада не получится, так как шапочка достаточно проблематично фиксируется в косу или пучок. Мешать будет эта стрижка и любительницам активных видов спорта.
4. Ограничены у каскада вечерние укладки, поэтому леди, любящие приемы, будут ломать голову, чем удивить публику. Косой пробор, покраска и подкручивание быстро надоедят. Сделанный сзади пучок или хвост нужно будет экстравагантно уложить, чтобы хорошо выглядеть. 
5. Строго запрещено выполнять двойной переход на поврежденных и ослабленных прядях. Каскад с секущимися кончиками выглядит очень неаккуратно. Не спасет стрижку модный вид рваной челки или красивые вьющиеся локоны, если у них пористая структура. 
6. Схема выполнения каскада непростая, поэтому стоит потрудиться в поиске стоящего специалиста. Вид укладки, красота косой, рваной или прямой челки напрямую зависит от умения парикмахера. 

Актуальные тенденции

Модные в этом сезоне каскадные стрижки совмещают в себе несколько стрижек, особенно на волосах длиной до плеч. Чаще всего их делают на базе каре или боба. Следите за тем, чтобы интересные образы создавали квалифицированные специалисты. 

В этом сезоне рекомендуется обрамлять каскад косой рваной челкой. Для женщин с узким лицом создан вариант длиной ниже плеч в виде каскада с шапочкой. Короткий слой отлично подчеркивает красоту выполнения стрижки и черты лица. Длинные локоны придают образу нежности и позволяют делать женские вечерние прически. 

Для круглого лица разработан модный вариант с шапочкой, имеющей очень короткие базовые пряди на макушке и рваный асимметричный вид внизу. Сочетание с косой челкой дарит образу изящество, делая форму лица более тонкой.

Понравилась статья? Помоги нашему сайту, расскажи о статье друзьям:

Арлекин КАСКАД : Классический.

Свяжитесь с нами для получения сметы

Арлекин КАСКАД известен как наиболее прочный и эластичный балетный линолеум. Идеальное покрытие для классического балета Арлекин КАСКАД получил заслуженное признание целого поколения профессионалов. На этом покрытии артисты чувствуют себя особенно уверенно, так как с одной стороны, оно не скользит, а с другой, способствует хорошему вращению.

Прекрасная сцепка и фон любому дизайну

Его ровная слегка рельефная поверхность создает прекрасный фон любому дизайну, оно не бликует. Способен выдерживать вес тяжёлых декораций. С успехом применяется во всём мире в качестве гастрольного пола для сцены или в залах.

Используйте его вместе с разборным балетным полом  Арлекин ЛИБЕРТИ илиАрлекин АКТИВИТИ для оптимальных условий для балета.

Specifications

• Ширина рулонов — 2m
• Длина рулонов — 10m, 15m, 20m, 25m
• Цвета — чёрный, серый, темно-серый, белый
• Спец.Цвета (сток по запросу)- Серый, Орех, Бежевый, Сиреневый, Гвоздика, Фиалка
• Толщина — 2mm
• Вес — 2.6kg/m²
• Пожарная классификация — Bfl-s1 (EN 13501-1)

Applications

Design

Guarantee

Для получения дополнительной информации посетите веб-страницу «Гарантия».

Cleaning and Aftercare

Файлы для загрузки

Арлекин КАСКАД : техническую спецификациюPDF1.57MB

Примеры применения

Опера Земпера в Дрездене
Театральный институт Барселоны
Культурный центр города Эльче

Свяжитесь с нами

Название:*
Выберите Г-нГ-жаФамилия:*
Имя:*
Компания:
Промышленность:
Выберите AcademyAcousticsAdult EducationAdviserAmateur DramaticsArchitectArts CentreAssociationBandBanking ServicesBarbershopBuilding ContractorChoirChurch/WorshipCollegeCommunity CentreConcert HallConductorConsultantCouncilCruise/ShippingDance AgencyDance CompanyDance SchoolDance TeacherDesignerDistributorEmergency ServicesEngineeringEvent OrganiserExhibitionFestivalFinancialFlooring ContractorGlazierHaulier/TransportHealth ServicesHotel/Restaurant/ClubIndependent SchoolInterior DesignInternational SchoolJunior SchoolLegal ServicesLeisure CentreLocal AuthorityManufacturerMediaMilitaryMulti Purpose HallMuseum/LibraryMusic GroupMusic SchoolNetworkingNightclubOperaOrchestraOther/UnknownPerforming Arts SchoolPhotographerPolice/Fire/AmbulancePreparatory SchoolPrinterPrivate IndividualProduction CompanyPublishingRecording StudioRetailerScenery/Theatre SupplierSchoolSet Design/ConstructionShippingSports CentreSports ClubState SchoolStructural EngineerStudentSupplierSurveyorTelecommunicationsTheatreTheatre CompanyTV StudioUniversityVillage HallWholesalerYouth ClubДолжность:
Адрес:*
Город:*
Область:*
Почтовый индекс:*
Страна:*

Please selectAndorraAfghanistanAland IslandsAlbaniaAlgeriaAngolaAnguillaAntarcticaAntigua and BarbudaArgentinaArmeniaArubaAustraliaAustriaAzerbaijanBahamasBahrainBangladeshBarbadosBelarusBelgiumBelizeBeninBermudaBhutanBolivia, Plurinational State ofBonaire, Sint Eustatius and SabaBosnia and HerzegovinaBotswanaBouvet IslandBrazilBritish Indian Ocean TerritoryBrunei DarussalamBulgariaBurkina FasoBurundiCambodiaCameroonCanadaCape VerdeCayman IslandsCentral African RepublicChadChileChinaChristmas IslandCocos (Keeling) IslandsColombiaComorosCongoCongo, the Democratic Republic of theCook IslandsCosta RicaCote d’IvoireCroatiaCubaCuracaoCyprusCzech RepublicDenmarkDjiboutiDominicaDominican RepublicEcuadorEgyptEl SalvadorEquatorial GuineaEritreaEstoniaEthiopiaFalkland Islands (Malvinas)Faroe IslandsFijiFinlandFranceFrench GuianaFrench PolynesiaFrench Southern TerritoriesGabonGambiaGeorgiaGermanyGhanaGibraltarGreeceGreenlandGrenadaGuadeloupeGuatemalaGuernseyGuineaGuinea-BissauGuyanaHaitiHeard Island and McDonald IslandsHoly See (Vatican City State)HondurasHong KongHungaryIcelandIndiaIndonesiaIran, Islamic Republic ofIraqIrelandIsle of ManIsraelItalyJamaicaJapanJerseyJordanKazakhstanKenyaKiribatiKorea, Democratic People’s Republic ofKorea, Republic ofKuwaitKyrgyzstanLao People’s Democratic RepublicLatviaLebanonLesothoLiberiaLibyaLiechtensteinLithuaniaLuxembourgMacaoMacedonia, the former Yugoslav Republic ofMadagascarMalawiMalaysiaMaldivesMaliMaltaMartiniqueMauritaniaMauritiusMayotteMexicoMoldova, Republic ofMonacoMongoliaMontenegroMontserratMoroccoMozambiqueMyanmarNamibiaNauruNepalNetherlandsNew CaledoniaNew ZealandNicaraguaNigerNigeriaNiueNorfolk IslandNorwayOmanPakistanPalestinePanamaPapua New GuineaParaguayPeruPhilippinesPitcairnPolandPortugalQatarReunionRomaniaRussian FederationRwandaSaint BarthelemySaint Helena, Ascension and Tristan da CunhaSaint Kitts and NevisSaint LuciaSaint Martin (French part)Saint Pierre and MiquelonSaint Vincent and the GrenadinesSamoaSan MarinoSao Tome and PrincipeSaudi ArabiaSenegalSerbiaSeychellesSierra LeoneSingaporeSint Maarten (Dutch part)SlovakiaSloveniaSolomon IslandsSomaliaSouth AfricaSouth Georgia and the South Sandwich IslandsSouth SudanSpainSri LankaSudanSurinameSvalbard and Jan MayenSwazilandSwedenSwitzerlandSyrian Arab RepublicTaiwanTajikistanTanzania, United Republic ofThailandTimor-LesteTogoTokelauTongaTrinidad and TobagoTunisiaTurkeyTurkmenistanTurks and Caicos IslandsTuvaluUgandaUkraineUnited Arab EmiratesUnited KingdomUnited StatesUruguayUzbekistanVanuatuVenezuela, Bolivarian Republic ofVietnamVirgin Islands, BritishWallis and FutunaWest IndiesWestern SaharaYemenZambiaZimbabweАдрес эл. почты:*
Телефон:*
Как вы узнали о нас?:*
Выберите Существующий клиентРекомендацияПоисковая системаЯ уже знал компанию АрлекинСсылкаАдрес курьераПубликацияВыставка/Торговые выставкиСправочникДругойПродукты, которые вас интересуют:*

Балетный полАксессуары
Балетное покрытиеСовет
Покрытия для событийных мероприятийНеизвестно
Балетный станок

Каковы будут сферы применения вашего покрытия?:*

Классика / БалетХип-хоп / Джаз / Городские танцы
Современная хореографияАэробика / Зумба
Танец модернБальные танцы
Ударные танцы (Фламенко / Чечетка …)Концерты
Сальса / Латиноамериканские танцыМногократное использование

Ваше сообщение:*

Информация, сообщенная вами, НЕ будет предоставляться другим компаниям. Отметьте это поле, если вы не хотите больше получать информацию о наших продуктах или специальных предложениях. 

Send to a friend

Вы хотите отправить эту информацию вашему другу?

молодежные стрижки для парней и девушек

Характерным признаком классического каскада является чередование в прическе прядей разной длины. Короткие пряди на макушке постепенно удлиняются по направлению к затылку. Не следует путать эту стрижку с лесенкой: техника выполнения у них разная. Несмотря на изменчивость моды, классический каскад долгие годы остается в числе самых актуальных причесок, причем как для женщин, так и для мужчин.

Преимущества стрижки

Главным достоинством классического каскада является его универсальность. Он подойдет всем типам лица, зачастую помогая скрыть некоторые недостатки внешности. Эта прическа отлично гармонирует с любым выбранным образом, сочетается с любой одеждой и подходит для каждого события — от рабочих будней до торжественного вечера. Но помимо универсальности существует и масса других преимуществ, которые убеждают остановить свой выбор именно на классическом каскаде:

• Стрижка помогает визуально сделать тонкие и редкие волосы более густыми и объемными.
• Многослойность позволяет создавать абсолютно неповторимые образы, просто меняя способ укладки.
• Прекрасно смотрится на прядях любой длины.
• Уход за стрижкой прост и не требует много времени и сил.
• Прическа прекрасно смотрится как с челкой, так и без нее.

Противопоказанием при выборе данной стрижки являются ломкие, ослабленные, истонченные волосы с секущимися кончиками, которые будут выглядеть неаккуратно и неухоженно, что сведет на нет все вышеперечисленные достоинства каскада.

Не подойдет эта стрижка и тем, у кого слишком густые или жесткие волосы, поскольку в этом случае пряди плохо укладываются и не держат форму. Слишком кудрявые волосы также являются противопоказанием для каскада.

Технология выполнения

Существует несколько способов создания каскада. Обычно классический вариант выполняется с использованием одной контрольной пряди на макушке. Эта прядь будет самой короткой из всех. К ней поочередно подтягивают волосы с затылка, темени и висков. При этом все волосы оттягиваются под прямым углом к макушке. В результате все слои прически равномерно распределяются по окружности, центр которой находится на макушке.

Удлиненный каскад также делается по одной контрольной пряди, к которой подтягивают прядки с других участков. Но при этом волосы с затылка оттягивают вместе с контрольной прядью параллельно полу, а с висков и темени — перпендикулярно. В конце формируется ровный дугообразный контур вокруг лица. При такой технике исполнения нижняя часть прически получается длиннее, чем в первом варианте.

Отличие каскада от лесенки

Обе эти стрижки являются многослойными, но в каскаде переходы от коротких прядей к длинным не сглаживают, а, наоборот, подчеркивают и обозначают резкими переходами. Прическа получается неоднородной, создавая впечатление легкости, воздушности и невесомости.

В лесенке каждую последующую прядь делают длиннее предыдущей. Прическа получается однородной, сглаженной, без переходов. Отличается только длина прядей по контуру. Эта стрижка довольно проста, она по силам любому начинающему парикмахеру. Каскад более сложен как в исполнении, так и в укладке.

На средних волосах

Принято считать, что лучше всего смотрится классический каскад на средних волосах. Многоступенчатая форма стрижки идеально сочетается с волосами до плеч, придавая прическе легкость, пышность и объем. Это особенно актуально для тех, у кого тонкие волосы, плохо держащие форму у корней. Особенность данной стрижки в том, что волосы начинают срезать на уровне ушей, плавно спускаясь к самым кончикам. Локоны по бокам нужно тщательно профилировать.

С помощью этой прически можно скрыть такие недостатки внешности, как крупный нос или широкие скулы.

На длинных волосах

В качестве актуальной стрижки на длинные волосы классический каскад остается одним из самых востребованных вариантов. Волосы, подстриженные этим способом, выглядят абсолютно естественно, при этом не требуется особых усилий для укладки. Переходы в такой прическе могут начинаться на разной длине — и на макушке, и ближе к концам. Этот вариант стрижки позволяет создавать естественный объем и хорошо смотрится даже без челки. Наиболее гармонично смотрится каскад на прямых длинных волосах без завитков.

Такая прическа поможет визуально скорректировать недочеты внешности обладательницам сердцевидного лица.

На коротких волосах

В качестве стрижки на короткие волосы классический каскад выглядит весьма дерзко и эффектно. В коротком варианте эта стрижка не требует тщательной ежедневной укладки, поэтому как нельзя лучше подходит энергичным, деловым, целеустремленным леди.

Классический каскад на коротких волосах поможет зрительно нивелировать такие недостатки внешности, как излишняя округлость щек, широкие скулы и высокий лоб, а также расширить овал слишком узкого лица.

Сделать узкое лицо мягче и круглее можно, завивая кончики волос наружу. Завитые к лицу пряди, наоборот, позволяют убрать излишнюю полноту лица.

Молодежные прически для девушек

Как правило, каскад на коротких волосах выполняется с челкой. Но молодые девушки, которые не боятся экспериментов со своей внешностью, могут себе позволить короткие стрижки без челки. Образ при этом может оказаться довольно агрессивным и резким, но зачастую именно к этому и стремятся юные особы, желающие выделиться и подчеркнуть свою индивидуальность. Для них более подходящим вариантом является рваный каскад, для создания которого пряди стригут в хаотичном порядке. Эти прядки имеют разную длину на всех участках головы.

При всей любви к экспериментам девушкам все же нужно учитывать, что короткие стрижки без челки подойдут только тем, у кого нет ярко выраженных недостатков внешности, которые можно легко скрыть с помощью челки.

Стрижки с челкой

Удачный выбор формы челки позволит существенно оживить образ, внести элемент разнообразия и подкорректировать внешность.

Каскад в сочетании с прямой челкой поможет скрыть слишком высокий лоб или длинноватый нос. Такая челка также поможет сделать более выразительными мелкие черты лица.

Прямая челка, доходящая до линии бровей, подойдет обладательницам прямоугольного лица с высокими скулами.

А вот круглолицым девушкам и обладательницам квадратного лица следует внести в прическу и челку как можно больше асимметрии, добавив по всему периметру побольше косых прядей.

Несколько локонов разной длины у лба позволят отвлечь внимание от слишком массивного подбородка.

Каскад, начинающийся от середины щеки, в сочетании с прямой челкой нивелируют треугольную форму лица.

Короткий каскад отлично сочетается с прямой челкой, концы которой выполнены в рваной технике. Та же стрижка на средних волосах хорошо смотрится с чуть удлиненной челкой, зачесанной набок.

Мужские варианты стрижки

Каскад — универсальная стрижка, популярная не только у женщин, но и среди представителей сильной половины человечества. Так же как и женская стрижка, мужской каскад подходит практически к любому типу лица. Он прекрасно смотрится на волосах любой длины. С его помощью можно создать классический, романтический образ, а также образ брутального мужчины.

Классический вариант этой стрижки можно сочетать с симметричным пробором, зачесывать волосы набок или назад. Так, например, прическа в деловом стиле может быть выполнена с гладко зачесанными назад прядями.

Молодежные стрижки для парней могут дополняться выбритыми висками или косым пробором, а также различными вариантами асимметрии. Волосы могут быть выстрижены по направлению к макушке. Молодежный каскад допускает различные варианты креативного окрашивания.

Варианты укладки

Каскад — стрижка, требующая укладки. Способ, которым будут уложены волосы, зависит от длины локонов.

• Короткие пряди достаточно просто подсушить, приподнимая их у самых корней. Часть из них можно обработать моделирующим гелем, в результате чего получатся эффектные «перышки».
• Удлиненные пряди можно уложить по-разному. Самый простой способ заключается в следующем: чисто вымытые волосы высушивают полотенцем, а после опускают голову вниз и сушат волосы феном от корней к кончикам. После этого берут на пальцы немного мусса или геля и закручивают концы. Если лицо узкое, их закручивают наружу, если широкое — вовнутрь.

Разнообразить варианты прически можно, укладывая прядки в разных направлениях, экспериментируя с челкой, используя необычные проборы или варианты начеса. Каскад на длинных волосах можно видоизменить, заплетая их в косы и пучки либо экспериментируя с завивкой кончиков.

Для укладки можно также использовать утюжки. В этом случае прическа обретет красивую гладкость. Щипцами гофре придается волнистость, благодаря чему образ становится более мягким и женственным.

С помощью бигуди разного диаметра можно получить дополнительный объем и пышность.

Вообще, каскад — это всегда стильно, модно и актуально. Отдавая предпочтение этой стрижке, человек подчеркивает свой хороший вкус, а также умение и желание следить за своей внешностью. Эта стрижка помогает создавать яркие, неповторимые, энергичные образы представителям как женской, так и мужской половины человечества. Она актуальна и востребована людьми всех возрастных категорий и всегда позволяет своим обладателям оставаться на пике моды.

Как стричь каскад — техника выполнения на длинные, средние, короткие волосы: 2018 фото пошагово – Thevolosy

Просто длинные волосы смотрятся скучно, к тому же такая укладка подходит не всем и для нее требуется специальный уход. Прямые локоны без структуры могут иметь неопрятный вид. Для создания оригинального образа можно выбрать каскад. Для этой прически не требуется особый уход, к тому же она прекрасно подходит для разных случаев. Что такое каскад? Это Красивая прическа, в которой волосы сострижены слоями. Укладка отлично подходит на короткие, средние и длинные пряди. Чтобы ее правильно уложить, необходимо ознакомиться с тонкостями процедуры. Для этого есть удобная схема, поэтому работу можно выполнить дома.

Стрижка каскад, как сделать стрижку на длинные волосы, стрижка со слоями.

Подготовительный этап

Перед процедурой потребуется подготовить все нужное для процедуры. В работе нужно будет пользоваться ножницами, зажимами, расческами и бутылкой-распылителем с водой.

Необходимо выбрать качественные ножницы. Они могут быть непрофессиональными, главное, хорошо заточенными. Определить это можно с помощью надрезания ваты. Если она разрезается хорошо, то ножницы подойдут для выполнения стрижки.

Благодаря зажимам можно фиксировать ненужные прядки. Для этого подойдут обычные заколки. Потребуются расчески для выполнения различных видов работ. Волосы нужно разделить на прядки, расчесать их, уложить. Благодаря пульверизатору волосы можно сделать влажными, что облегчает стрижку.

Стрижка каскад (лесенка) на средние и длинные волосы by Дмитрий Микеров

Особенности процедуры

После подготовки к процедуре всего необходимого следует ознакомиться с особенностями выполнения стрижки на короткие, средние и длинные волосы. Укладка является универсальной, поскольку она одинаково удачно подходит для прямых и кудрявых прядей.

• Укладка на длинные волосы смотрится оригинально. При этом есть несколько вариантов создания образов. К примеру, сзади пряди могут быть ровными, клином или полукругом. На длинные локоны можно выполнить градуировку. Если пряди густые, то верхние не должны быть короткие, так как образ не будет аккуратным.
• Для круглого и овального лица лучше выбрать укладку со средними волосами. Это позволит сделать образ гармоничным.
• Каскад на короткие волосы сделает образ легким. Для укладки нужно уделять много времени. Короткие прически можно уложить лаками, гелями, муссами, пенками, восками. Укладка подобна каре, отличия состоят только в срезе. Каскад на короткие локоны имеет срез в виде лесенки, благодаря чему получается естественный образ.

МАСТЕР-КЛАСС. СТРИЖКА КАСКАД. Легко и просто. Видео-урок для начинающих парикмахеров.

Этапы процедуры

После выбора варианта прически можно приступать к работе. Техника стрижки каскад предполагает процесс выполнения следующих этапов:

1. Сначала необходимо отделить прядки от волос. Для процедуры можно взять расческу с частыми зубчиками. Необходимо отделить локон, переложить вперед и закрепить.
2. Затем следует выполнить центральный пробор, который нужно продлить до ушей. С таким методом можно отделить 2 большие пряди.
3. Каждую прядку необходимо зафиксировать зажимами. Желательно воспользоваться заколками с частыми зубчиками.
4. Затем нужно распустить первую прядку. Потом следует отмерить1,3 см волос от обоих боков пряди и закрутить их отдельно.
5. Локоны с предыдущего этапа необходимо скрепить, отмерить 2,5 см от конца, поднять их.
6. После этого следует сжать локоны пальцами и отрезать 2,5 см.
7. Для улучшения каскада надо выполнить филировку кончиков отрезанной прядки. Чтобы получилась прическа с плавным переходом, следует чередовать филировку и ровное подрезание.
8. Подобным методом выполняется работа со всеми прядями, закрученными у лица.
9. Пряди надо приподнять вверх, зажать и потом обрезать.
10. Затем надо обработать боковую сторону. Пряди надо отделить с каждой стороны, собрать вместе, отмерить 2,5 см, поднять их вверх и отрезать.
11. Такая работа выполняется со всеми прядями.
12. После выполнения работы необходимо начесать прическу, посмотреть, является ли она ровной.
13. Голову нужно помыть, и выполнить аккуратную укладку. После этого прическа готова.

Такая схема позволяет создавать прекрасную прическу для разных типов прядей.

Короткая стрижка каскад / Техника стрижки каскад

Особенности домашней процедуры

Челка делает образ завершенным, а в гармонии с каскадом она будет выглядеть еще лучше. Такой вариант всегда в моде. Можно сначала выполнить прическу, а затем создать челку. Видов стрижки может быть много. Причем они выполняются как в салонных условиях, так и домашних.

Прекрасный образ получается с каскадом и косой челкой. Такой вариант выглядит аккуратно и модно. Выполнить его можно для обладательниц всех типов прядей.

Любительницы оригинальных образов могут выбрать градуированная прическа с элементами асимметрии. Он может быть выполнен со средними и длинными прядями. Сделать образ эффектнее поможет треугольная челка.

Каскад с челкой имеет некоторые ограничения. К примеру, с густыми, длинными, тяжелыми прядями не всегда сочетается челка. Она утяжеляет черты лица.

Поэтому сначала необходимо посоветоваться с парикмахером, который поможет выбрать наиболее привлекательный вариант. Для круглого лица отлично подходит укладка с асимметричной челкой, но ему не подойдет короткая стрижка. Для прямоугольного типа лица лучше выбрать классическая прическа, при котором выполняется ровный пробор и косая челка. Если прическа будет подобрана к типу лица, то она будет гармонично смотреться в образе.

Техника стрижки каскад дома

Каскад Классик

Дом

Каскад
Классика

В
память о Бене Колине Манфреди, 27 ноября 1978 г. — 9 ноября 2003 г.

Катание на лыжах
Восхождение на каяках

Вы чувствуете это? Таинственный
горизонты, тошнотворные крутые склоны, смутные линии адреналина.Природа
искушения борются со здравым смыслом. Ошеломляющая приверженность, когда вы
подвергайте сомнению каждый поворот, каждый шаг, каждое дыхание. Это будет последнее?

От снежных вершин до реки
долины, здесь и находятся наши ответы. Лучшее и худшее в спорте, которое мы
зови жизнь. Это наш дом, наша детская площадка Cascade Classics.

Кто мы

Юмор

Хронологический порядок

Фильмы

Гостевая книга
(Новый)

Первые спуски

Ссылки

Новый:

БЕН
МЕМОРИАЛЬНАЯ СТАТЬЯ: Память

РЕКА ЭЛЬВА, 9 НОЯБРЯ 2003 г .:

Final Classic

Каньон Рика,
31 октября 2003 г.

TopTyeRiver, 25 октября 2003 г.

Оханепекош
Река, 19 октября 2003 г.

Прозрачный
Разветвление реки Коулиц, 18 октября 2003 г.

Верхний
Верхний Циспус, 17 октября 2003 г.

Мистоканьон,
7 сентября 2003 г.

СТРАНА ЧУДЕС
TRAIL, 29-31 августа 2003 г .: Новое пополнение

Крепление
Олимп, 2 августа 2003 г.

Гранд
Каньон реки Эльва, 25 июля 2003 г.

Ясная вилка реки Коулиц,
13 июля 2003 г.

Гора Рейнир, ледник Эммонс, 12 июля 2003 г.

White Salmon River, HusumFalls, 5 июля 2003 г.

Река белого лосося, Зеленая ферма, 5 июля 2003 г.

Река белого лосося, приусадебные участки, 5 июля 2003 г.

Крепление
Адамс, ледник Лайман, 27-28 июня 2003 г.

Крепление
Адамс, Северная стена Северо-Западного хребта, 27-28 июня 2003 г.,

Комментарии, вопросы, проблемы:

mailto: CascadeClassics @ Hotmail.com

Заявление об отказе от ответственности: Мои увлечения опасны по своей природе, и все поездки
и действия, описанные на этом веб-сайте, несут риск серьезной травмы или
смерть. Любой, кто не является экспертом в моих хобби, должен использовать опытный,
квалифицированного гида или обратитесь за квалифицированным инструктажем, прежде чем заниматься любым видом
увлечения. Этот сайт не является руководством.

FastCounter
по bCentral

http: // www.bcentral.com/fastcounter/

Онлайн-квалификация CrossFit® Cascade Classic 2019 | На платформе Competition Corner ®

Описание события

Онлайн-квалификация CrossFit® Cascade Classic — единственный путь к главному событию 2019 года в Сиэтле, штат Вашингтон. Заработайте свое место на большой сцене в этом трехнедельном онлайн-соревновании. Две тренировки будут выпускаться каждую неделю в течение трех недель с 19 июня по 8 июля. Тренировки будут публиковаться каждую среду, а результаты — в следующий понедельник.

CrossFit® Cascade Classic Online Qualifier — это не только испытательный полигон для тех, кто хочет принять участие в главном событии в Сиэтле, но и место, где представители местного фитнес-сообщества могут собраться вместе и поделиться опытом со спортсменами со всего мира. стране и по всему миру. Нам всем лучше, когда мы вместе стремимся.

30 лучших мужчин и женщин пройдут в элитный дивизион. Команды из четырех человек, состоящие из двух мужчин и двух женщин, также будут принимать участие в соревнованиях.В этом году у команд будет два дивизиона: Rx и средний уровень. В промежуточном дивизионе будут более легкие нагрузки для подъемных движений, а также не будет сложной гимнастики. 30 лучших команд квалификационного турнира получат право на участие в командном соревновании Rx и шанс заработать командный денежный приз в размере 3000 долларов США. Также есть отдельные места для Rx, Masters 35-39yrs, 40-44yrs, 45-49yrs и 50+ yrs, Scaled и Teen.

Главное событие состоится в ангаре 30 в парке Магнусон в Сиэтле, штат Вашингтон, 21 и 22 сентября.В главном турнире есть почти 20 000 долларов наличными. Существуют денежные призы для трех лучших финалистов в дивизионах Elite, Rx Team и обоих Masters. Также предусмотрены денежные выплаты за победы в отдельных событиях.

Даты квалификаций

1-я неделя: 19-24 июня

2 неделя: 26 июля — 1 июля

Неделя 3: 3-8 июля

Регистрация на онлайн-квалификацию ® Cascade Classic открывается в среду, 27 марта 2019 г., в 8:00 по тихоокеанскому времени и закрывается после первой недели квалификации в среду, 24 июня 2019 г., в 17:00 по тихоокеанскому времени.

Будет выпущено шесть тренировок, по две за раз, в течение трех недель. Тренировки на каждую неделю должны быть завершены и отправлены к 17:00 в понедельник после их выпуска.

Спортсмены могут заявиться как индивидуально, так и в составе команды; однако, если спортсмен квалифицируется как индивидуальное лицо, а также как часть команды, он может принять только одно приглашение на финальное ЛИБО индивидуальное или командное занятие.

Cascade Crest Endurance Run

Последние новости !!

Важное обновление, касающееся гонки 2021 года !!

Мы все с нетерпением ждем более здорового 2021 года.

Как вы помните, все участники и списки ожидания были перенесены с прошлого года.

Список ожидания 2021 года: Период для запроса добавления в список ожидания 2021 года — вторая половина февраля, 15 февраля до конца 28 февраля 2021 года. Если вы хотите, чтобы вас добавили в список ожидания на 2021 год, отправьте электронное письмо по адресу info @ cascadecrest100.com до конца февраля !!

Участники: Все участники получат 100% кредит для регистрации, но, да, вам нужно будет пройти повторную регистрацию.Это для нас, чтобы получить положительное подтверждение того, что вы знаете, что вы перешли с прошлого года, и что вы все еще хотите работать. После завершения перерегистрации всем участникам будет отправлено отдельное электронное письмо. Вы можете ожидать, что электронное письмо о регистрации будет готово к концу этой недели (10 января 2021 г.). Вам нужно будет перерегистрироваться до 31 января со 100% скидкой с прошлогодней заявки.

Возврат: Участники смогут до 31 января запросить возврат 90% (270 долларов США) за прошлый год.Если вы не перерегистрируетесь для участия в мероприятии этого года или не запросите возврат средств до 31 января, вы пожертвуете прошлогоднюю запись на наши благотворительные цели — Спасибо! Нет возврата за прошлогодние листы ожидания, потому что ни с одного из вас не было списано никаких средств. Это происходит, когда вы присоединяетесь к списку абитуриентов.

Списки ожидания: В этом году мы будем поддерживать список ожидания в автономном режиме, а обновления размещать на странице участников Cascade Crest 100. Это будет обновляться примерно раз в неделю, а с приближением лета — чаще.

ВАЖНО: Всем участникам списков ожидания 2020 года, которые хотят сохранить свое место в списке ожидания, необходимо отправить электронное письмо Ричарду, директору гонки, по адресу [email protected] и указать свое желание остаться в списке ожидания. Как и в случае с участниками, этот шаг дает нам положительное подтверждение того, что вы желаете сохранить свое место (или более высокое) в списке ожидания с прошлого года. Вы можете отправить это письмо в любое время с 15 по 31 января 2021 года. Пожалуйста, не отправляйте электронные письма, чтобы занять свое место до 15 января — у вас их два.Более 5 недель с 15 по 31 января, чтобы написать мне письмо, чтобы занять ваше место в списке ожидания. После этого список ожидания будет открыт для других, чтобы добавить свои имена в конец списка. Да, другие участники, не включенные в прошлогоднюю лотерею, смогут присоединиться к нижней части списка ожидания, как только у существующих участников и списков ожидания будет достаточно времени, чтобы решить занять ваше место. Сообщите своим друзьям, что возможность присоединиться к списку ожидания откроется 15 февраля, а также отправьте электронное письмо Ричу по адресу info @ cascadecrest100.com.

Работа по следам: Требование о работе по следам возвращается на данный момент. Работа трейла с 2020 года не переворачивается. Выкупы для трейловых тренировок с 2020 года делают перенос позиций — подробнее об этом.

Квалификатор: Нормальное требование квалификатора возвращается, хотя мы снова будем принимать самопровозглашенные трассы длиной более 45 миль, подтвержденные файлом GPX / ссылкой на активность Garmin / Strava и отчетом о поездке, отправленным нам через онлайн-форму. Конечно, результаты гонки также дадут квалификацию.Дайте нам хотя бы до 15 февраля, чтобы обновить систему, пожалуйста, не отправляйте до этого момента. Для справки, обычным квалификационным требованием является прохождение трейла 100 миль за все время или 50+ миль трейлового забега с как минимум 6500 футами набора высоты в этом году.

Пожалуйста, загляните на этот сайт в ближайшее время для получения более подробной информации или по электронной почте [email protected] с любыми вопросами. Пожалуйста, подождите, дождитесь ответов на электронные письма. Мы очень оптимистичны, увидимся всех вас в Истоне в Августе!

Рич, Венди, Адам, Келли, Роб, Кент, Глен и Кевин

Обзор гонки

Cascade Crest — это сложная 100-мильная трасса, проходящая через Центральные каскады штата Вашингтон.В настоящее время трасса проходит по часовой стрелке от пожарной части Истона. Гонка начинается в 9:00 утра в субботу, а общее время ограничено 34 часами.

Рэнди Герке основал и руководил гонкой с 1999 по 2005 год. Чарли Криссман руководил гонкой с 2007 по 2012 год. Их усилия сделали Cascade Crest одним из лучших 100-мильных гонщиков в стране.

В 2016 году трасса была расширена и охватывала Блоуаут-Маунтин. Это изменение добавило примерно 3.2 мили и 1000 футов подъема до исходного курса.

Рекорд текущей (более длинной) трассы — 18:03:00, установлен в 2018 году трехкратным победителем Джесси Лэнгом из Ричленда, штат Вашингтон.

Рекорд исходного курса — 17:56:50, установленный в 2014 году Сетом Свенсоном из Миссулы, штат Монтана.

Женский рекорд — 19:25:56, поставленный Алиссой Сент-Лоран из Эдмонтона, Альберта; поставил в 2015 году на оригинальный конечно.

Самое быстрое время женщин на текущем, более длинном маршруте — 21:16:26, установленное Йиткой Винн в 2019 году.

Квалификация гонки

Участники должны пройти организованную трассу длиной 50 миль или более (с набором высоты не менее 6500 футов) в период с 1 января 2020 года по 31 июля 2020 года, ИЛИ когда-либо завершили организованную трассу длиной 100 миль. Не должно быть двусмысленности в том, что ваша квалификация — это «трейловый» забег. Cascade Crest 100 — это непросто … готовьтесь соответственно. Если вам нужно спросить, можно ли считать такие-то 50M гонкой по пересеченной местности, то, вероятно, это не так. Думайте в первую очередь о грунтовой дороге с односторонним движением.

Требования к работе по следам

Абитуриентам предоставляется 8 часов работы в трейлере. Эта работа по трассе должна быть завершена в период с 1 января по 31 июля, чтобы засчитываться для гонки в этом году, а также должна выполняться с организованной рабочей группой, такой как PCTA, WTA или другая организация по работе с трассой. Документация по вашей следовой работе должна быть заполнена с помощью онлайн-формы до 1 августа. Работа по пересеченной местности может выполняться там, где это удобно для бегуна. Мы рекомендуем связаться с вашим местным офисом Лесной службы США, чтобы узнать о возможностях работы на тропах.Для местных жителей Вашингтонская ассоциация троп проводит рабочие вечеринки почти каждые выходные в красивых местах по всему штату. Требование работы по следу распространяется на всех поступающих. Волонтерство на скачках не считается работой по пересеченной местности.

Политика отмены

Участникам, которые отменили свою регистрацию до 1 августа, будет возмещено 150 долларов в электронном виде только через PayPal. Не участвуйте, если вы не готовы отказаться от оставшейся части вступительного взноса, если вы не можете участвовать.

Еще вопросы?

Посетите этот сайт. Присоединяйтесь к нашей странице в Facebook и спрашивайте других бегунов.
Еще вопросы? Свяжитесь с нами по электронной почте.

Marson and Marson Lumber Cascade Golf Classic

СПАСИБО! Гольф-турнир имел успех на многих уровнях. Так много веселья, что мы смогли собрать более 42 000 долларов на нашу кампанию по обеспечению безопасности машин скорой помощи.

Хотите посмотреть веселые фото? Спасибо P2X Studio за эти забавные снимки — НАЖМИТЕ ЗДЕСЬ .

Посмотрите, кто были главными победителями:

Командные соревнования:

1. Том Уорли, Кайл Льюис, Кейси Перри и Марк Блэкни

2. Боб Адамсон, Дэн Холзер, Кевин Тейлор и Рич Адамсон

3. TIE — Марк Рогстад, Мэтт Рогстад, Майкл Рогстад ​​и Чак Стилвагон

и Эрик Джонсон, Сонни Бристоль, Скарлетт Кендрик и Брайон Мешам

Лучший общий балл — 49: Би Джей Лоуз, Дарин Хасеби, Джек Лоус и Рой Шиферл

Самый точный результат: женщины — Джерри Холфельдт, 6 футов 2 дюйма; мужчины — Дэвид Лестер, на линии

Ближе всего к булавке, лунка № 5: женщины — Мелисса Гримм, 22 фута 1 дюйм; мужчины — Джон Генри, 8 футов 7 дюймов.

Ближайший к булавке отверстие № 15: женщины — Анита Уилки, 6 футов 2 дюйма; мужчины — Бо Стоунфилд, 9 футов 2 дюйма.

Longest Drive: женщины — Энн Коул; Мужчины — Брайан Винсент

Chipping Contest — Райан Стэнфорд, 1 ‘

Паттинг — Майк Морано, дырка в одном

Driving Range — Кейси Перри, 2 попадания на остров

Когда: Понедельник, 21 июня 2021 г., новое время начала в 11:00
Где: Новое место на поле для гольфа Kahler Glen , 20700 Clubhouse Drive, Ливенворт

БУКЛЕТ С ПРАВИЛАМИ ГОЛЬФА ЗДЕСЬ

Мы знаем, что вы ожидаете великолепного дня игры в гольф по разумной цене.

За 100 долларов вы получите:

• Раунд гольфа
• Тройник призовой
• Сытный обеденный мешок
• Соревнования по пултингу и чипированию
• Соревнования по дистанции, включая самый длинный привод, самый близкий к штифту и самый точный привод
• Hole-in-One шанс выиграть автомобиль или другие призы
• Жетон напитка
• Фото вашей четверки
• Соревнование по водной тренировке и за небольшую плату шанс выиграть бутылку вина Игл-Крик

По многочисленным просьбам вы можете приобрести 1 или 2 пакета мероприятий, чтобы заключить сделку в веселый день игры в гольф.

За каждые дополнительные 20 долларов вы получаете:

• 1 мешочек
• 1 муллиган
• 1 жетон дополнительного напитка

Турнир начнется с «дробового» старта серенадой альпихов. Это формат скремблирования. Призы доступны за самый низкий командный результат, самый длинный привод, точный привод, ближайший к штифту, вставку и скалывание. Награды будут объявлены и вручены в конце турнира за пределами клуба.

В этом году, поскольку собрания в закрытых помещениях по-прежнему сопряжены с повышенным риском, мы решили не проводить банкет с наградами.

Щелкните здесь, чтобы получить информацию о спонсорстве

РЕГИСТРАЦИЯ ЗАКРЫТА. ГОЛЬФОРЫ, СКОРО УВИДИМСЯ!

Ежегодная выставка классических автомобилей в Cascade Village

Ежегодная выставка классических автомобилей в Cascade Village

Автор: Cascade Village

С наступлением теплой погоды Бенд будет стремительно развиваться мероприятиями на свежем воздухе! Выставка классических автомобилей — отличный способ увидеть аккуратные классические машины, выходя на улицу и наслаждаясь теплой погодой с семьей.

Отметьте начало лета на Ежегодной выставке классических автомобилей!

Ежегодная выставка классических автомобилей пройдет 16 июня — за день до Дня отца — в торговом центре Cascade Village и на ней будут представлены автомобили 1970-х годов и старше! С жаркой погодой это отличный способ провести время всей семьей, наслаждаясь взрывом прошедшего мероприятия — и не забывайте о продавцах и музыке!

Может быть трудно понять, на какую автомобильную выставку пойти. Ежегодную выставку классических автомобилей в Cascade Village, безусловно, нельзя пропустить, особенно из-за разнообразия автомобилей.Пойти на выставку автомобилей может показаться утомительным занятием, особенно если вы мало разбираетесь в автомобилях. Но не волнуйтесь, автомобильное сообщество очень гостеприимно и с нетерпением ждет возможности поговорить с вами об автомобилях! И это также отличный способ узнать больше об интересующих вас автомобилях. Сделайте шаг назад во времени и посмотрите, каким был стиль в те дни — совершенно классный, чувак!

Куда пойти на представление

В Bend происходит так много всего, что может быть непросто понять, куда вам следует идти. Наслаждайтесь атмосферой под открытым небом в торговом центре Cascade Village в Бенде! Вы даже можете сделать покупки или перекусить, когда закончите проверять хотроды! Мы предлагаем идеальный способ делать покупки и пообедать.У нас есть виды на красивые Каскады, пешеходные тротуары, музыка под открытым небом и тщательно продуманный ландшафтный дизайн. Выставка будет расположена возле JCPenney на Hwy 20 со стороны торгового центра Cascade Village.

Не забудьте зарегистрироваться

Если вы подаете автомобиль на Ежегодную выставку классических автомобилей в Cascade Village, каждый въезд имеет вступительный взнос в размере 15 долларов США и ограничение на один автомобиль. Ежегодная выставка Classic Car Expo будет состоять из шести отделов на разные десятилетия! В каждом дивизионе будет победитель.А теперь поговорим о призах. В магазинах и ресторанах торгового центра Cascade Village появятся памятные доски, подарочные карты от спонсоров и подарочные сертификаты!

Если вы энтузиаст классики или просто хотите побыть на улице с семьей, Annual Classic Car Expo обязательно будет веселым мероприятием. Зайдите в Cascade Village в субботу, 16 июня, в 9 утра, чтобы насладиться этим грандиозным событием в области классических автомобилей!

Структура и активация C1, комплекса, запускающего классический путь каскада комплемента

Значение

Система комплемента является важным звеном в рамках врожденной иммунной защиты.Комплемент способствует устранению объектов, представляющих сигналы опасности, таких как патогены, умирающие клетки-хозяева и аномальные молекулярные структуры, и способен вызывать воспалительный ответ, стимулирующий дальнейшие иммунные ответы. Комплекс C1 — это гигантский протеолитический фермент, играющий ведущую роль, поскольку он является первым компонентом протеолитического каскада, инициируемого при активации комплемента. На основании структурной характеристики комплекса C1 с помощью рентгеновских лучей и электронной микроскопии мы предполагаем, что первая протеолитическая реакция в каскаде, активация самого комплекса C1, вовлекает соседние комплексы C1, расположенные рядом друг с другом, а не реакцию внутри отдельных Комплексы С1.

Abstract

Система комплемента является важным противомикробным и вызывающим воспаление компонентом врожденной иммунной системы. Классический путь комплемента активируется при связывании комплекса C1 774 кДа, состоящего из молекулы распознавания C1q и тетрамерного протеазного комплекса C1r ₂ s ₂ , с различными активаторами, представляющими определенные молекулярные структуры, такие как IgG- и иммунные комплексы, содержащие IgM. Каноническая модель включает в себя C1r ₂ s ₂ с его доменами сериновой протеазы, плотно упакованными вместе в центре C1, и сложный механизм внутримолекулярной реакции для активации C1r и C1s, индуцируемой при связывании C1 с активатором.Здесь мы показываем, что домены сериновой протеазы C1r и C1s расположены на периферии тетрамера C1r ₂ s ₂ как в отдельности, так и внутри неактивированного комплекса C1. Наши структурные исследования показывают, что комплекс C1 принимает конформацию, несовместимую с внутримолекулярной активацией C1, предполагая вместо этого, что происходит межмолекулярная протеолитическая активация между соседними комплексами C1, связанными с активирующей комплемент поверхностью. Наши результаты объясняют, как множество структурно несвязанных молекулярных паттернов могут активировать C1, и предполагают консервативный механизм активации комплемента через классический и связанный с ним лектиновый путь.

Система комплемента является важным компонентом врожденного иммунитета, участвующим в клиренсе иммунных комплексов и распознавании, фагоцитозе и уничтожении вторгшихся патогенов. Кроме того, комплемент ценится за его роль в поддержании гомеостаза за счет удаления апоптотических и некротических клеток. Несколько линий доказательств теперь также предполагают участие комплемента в процессе развития тканей (1). Активация комплемента происходит, когда комплексы между молекулами распознавания образов (PRM) и сериновыми протеазами иммобилизуются на представляющих активатор микроорганизмах или связанных с опасностями молекулярных структурах.Молекулярно описаны три основных пути активации: классический путь (CP), лектиновый путь (LP) и альтернативный путь (AP). Активация CP или LP приводит к расщеплению белков комплемента C4 и C2, что приводит к сборке комплекса C4b2a, протеолитического фермента, известного как конвертаза CP C3. Эта протеаза переключает несколько молекул C3, и генерируемые молекулы C3b инициируют самоусиливающийся AP, что значительно усиливает результат активации CP или LP.

CP инициируется, когда комплекс C1 связывается с активатором. Комплекс C1 образован PRM C1q и гетеротетрамером C1r ₂ s ₂ , содержащим две протеазы C1s, расположенные в центре, и одну протеазу C1r снаружи каждой молекулы C1s (2, 3). C1q состоит из шести гетеротримеров, каждый из которых содержит цепи C1qA, C1qB и C1qC. Каждая цепь имеет центральную область, образующую коллагеновый стержень вместе с эквивалентными областями двух других цепей. С-концевые части трех цепей вместе образуют глобулярную головку, называемую gC1q, отвечающую за распознавание активатора, тогда как короткие N-концевые области несут межцепочечные дисульфидные мостики, стабилизирующие C1q (рис.1 А ). N-концевая часть шести коллагеновых стержней C1q (~ 35 остатков) организована в цилиндрическую структуру, после чего они расходятся на отдельные стержни после изгиба в каждом коллагеновом стержне, вызванного несовершенным триплетным паттерном GXY в C1qA и C1qC ( 4). C1r и C1s являются структурно гомологичными сериновыми протеазами (SP) с доменной архитектурой CUB1-EGF-CUB2-CCP1-CCP2-SP (рис. 1 A ). В тетрамере C1r ₂ s ₂ две молекулы C1s димеризуются через свои домены CUB1-EGF, и аналогичная организация «голова к хвосту», включающая также домены CUB1-EGF, была предложена для интерфейса C1r-C1s ( 3, 5).Контакты между тетрамером C1r ₂ s ₂ и шестью стержнями коллагена C1q сосредоточены на взаимодействиях между конкретными боковыми цепями лизина C1q с отрицательными боковыми цепями, организованными вокруг сайтов Ca ²⁺ в C1r CUB1, C1r CUB2 и Домены C1s CUB1, в результате чего в тетрамере C1r ₂ s ₂ образуются шесть сайтов связывания коллагена (6, 7).

Рис. 1.

Организация субъединиц C1 и активация классического пути. ( A ) Доменная структура C1q и C1r.В C1q «Nt» обозначает короткую N-концевую область во всех трех субъединицах C1q, участвующих в дисульфидных мостиках. В C1r ромб обозначает сайт связывания C1q, звездочкой — сайт активации и треугольником — активный сайт. В C1s отсутствует сайт связывания C1q в домене CUB2, но в остальном он имеет ту же структуру домена, что и C1r. ( B ) Неактивированный C1 (слева) с C1r и C1s в состоянии зимогена (серый цвет) присутствует в жидкой фазе и рекрутируется на поверхность активатора, где C1r автоматически активирует и впоследствии активирует C1s.Ниже показаны последующие события, происходящие после активации C1s, начиная с расщепления C4, затем расщепления C2 и заканчивая сборкой конвертазы CP C3.

При связывании C1 с активирующей поверхностью каждая молекула C1r расщепляется другой молекулой C1r, вызывая аутоактивацию. Затем активный C1r расщепляет C1s, после чего C1s может расщеплять свои субстраты C4 с образованием C4b и C4b-связанного C2, что приводит к сборке C3 конвертазы, C4b2a (Fig. 1 B ). Отсутствует подробное понимание активации C1 на основе структуры.ЭМ-изображения отрицательного окрашивания неактивированного C1 были интерпретированы как предполагающие, что центральная часть C1r ₂ s ₂ была расположена внутри конуса, ограниченного коллагеновыми стеблями C1q, тогда как остальные части C1r ₂ s ₂ были обернуты вокруг коллагеновых стеблей (8). Более поздние модели, учитывающие частичные кристаллические структуры C1r и C1s, предположили, что домены CCP1-CCP2-SP как C1r, так и C1s заправлены в пустоту, ограниченную доменами CUB1-EGF C1r и C1s, стержнями коллагена C1q и gC1q. домены (5, 7).Преобладающие модели активации C1 утверждают, что связывание активатора приводит к конформационной перестройке в стеблях коллагена C1q, которая вызывает структурную реорганизацию ассоциированного C1r ₂ s ₂ , приближая два домена SP C1r достаточно близко, чтобы активировать друг друга (9 , 10). Предполагается, что после активации C1r и последующей активации C1s в том же тетрамере, SP домены C1s становятся доступными для субстратов, C4 и C4b2.

До недавнего времени считалось, что подобный механизм внутримолекулярной активации управляет активацией внутри LP.Однако биохимические данные показали, что активация LP происходит посредством межмолекулярного протеолитического расщепления между доменами SP из димеров сериновой протеазы (MASP), связанных с маннан-связывающим лектином (MBL), расположенных на разных PRM. Роль активирующего гликанового паттерна, следовательно, заключается в создании локальной высокой концентрации комплексов PRM-MASP и в правильной ориентации MASPs относительно друг друга (11). Поддержка этой модели была получена с помощью малоуглового рассеяния рентгеновских лучей (SAXS) и электромагнитных исследований MBL в комплексе с неактивированным димером MASP-1 (12).Мы намеревались исследовать, способствует ли структура комплекса C1 межкомплексной протеолитической активации или действительно совместима с внутрикомплексной активацией C1, как предполагает преобладающая модель.

Результаты

C1r

₂ s ₂ Тетрамер сильно расширен.

Чтобы получить структурное представление о состоянии раствора C1r ₂ s ₂ , мы собрали данные синхротронного МУРР для тщательно очищенного рекомбинантного C1r ₂ s ₂ (рис.2 A ) с мутацией S / A в обеих протеазах, делающей тетрамер неактивным ферментом. Анализ Гинье показал линейный график для C1r ₂ s ₂ в диапазоне концентраций 1,0–6,8 мг / мл, но со слегка устойчивым увеличением значений R _г . Мы экстраполировали данные до 0 мг / мл и создали объединенный набор данных из экстраполированных данных и данных, записанных при 6,8 мг / мл (рис. 2 E и F и рис. S1 A ). Для последующих шагов мы использовали объединенные данные с q <2.5 нм ^-1 [ q = (4 × π × sin θ) ÷ λ, где 2θ — угол рассеяния]. График Кратки данных показал, что C1r ₂ s ₂ хорошо сложен и имеет ограниченную гибкость (рис. S1 B ). Функция распределения парных расстояний (P (r)) показала, что D _max для частицы находится чуть ниже 45 нм (фиг. 2 F ), что является непосредственным свидетельством против компактной конформации тетрамера. Чтобы получить структуру решения тетрамера C1r ₂ s ₂ на основе МУРР, мы использовали твердотельное моделирование, исходя из моделей тетрамера на основе известных субструктур C1r и C1s (рис.S1 C ). Ядро моделей тетрамера образовано доменом CUB1-EGF из двух молекул C1s, связанных двойной осью вращения, каждая из которых окружена доменами CUB1-EGF из C1r (рис. 3 A и B ). Наилучшие результаты с точки зрения соответствия экспериментальным данным и внутренней согласованности между результирующими моделями были получены при разделении как C1r, так и C1s на четыре твердых тела, состоящих из CUB1-EGF, CUB2, CCP1-CCP2 и области SP. Модели из 50 уточнений твердого тела были разделены на две группы в соответствии со значениями χ ² их соответствия данным.Основная группа из 43 моделей соответствовала данным МУРР с χ ² = 1,78 ± 0,05, тогда как остальные семь моделей имели χ ² , равное 2,60 ± 0,15. Выходные модели в основной группе были довольно похожи с доменами CCP1-CCP2-SP, изогнутыми в обе стороны от плоскости, по сравнению с довольно плоской начальной моделью (рис. 3 B и C ). Удаление гликанов из входной модели привело к появлению 10 моделей с χ ² = 3,56 ± 0,45, показывая, что гликаны внесли значительный вклад в сопоставление моделей с данными, хотя 12 Asn-связанных гликанов составляют менее 10% от общего количества гликанов. общая молекулярная масса тетрамера.Важно отметить, что модели, полученные в отсутствие гликана, были аналогичны моделям, полученным с включенными гликанами. Модель с наименьшим χ ² = 1,68, которая является репрезентативной, показана на рис. 3 D и соответствует данным на рис. 2 E . Домены SP как от C1r, так и от C1s выступают из центрального тетрамерного интерфейса CUB1-EGF. Каталитические центры двух SP-доменов C1r разделены на 39 нм, тогда как центры C1s находятся на расстоянии 28 нм друг от друга.Сайт активации в одной молекуле C1r находится на расстоянии 37 нм от активного центра во второй молекуле C1r.

Рис. 2.

Очистка и сбор данных SAXS для C1r ₂ s ₂ и C1. Окрашенные серебром гели SDS / PAGE фракций от препаративной очистки С1 и его компонентов в градиенте плотности сахарозы. ( A ) Комплекс C1r ₂ s ₂ был рекомбинантным, и активный сайт S / A был мутирован для предотвращения аутоактивации. C1r имеет примерно 80 кДа, а C1s чуть ниже примерно 77 кДа.( B ) C1q, очищенный из сыворотки крови человека, обратите внимание, что C1qA и C1qB объединяются в верхней полосе, тогда как C1qC мигрируют с более низкой молекулярной массой. ( C ) Выделение восстановленного C1, образованного смешиванием C1q с избытком C1r ₂ s ₂ . Образцы в A, — C были восстановлены перед SDS / PAGE. Фракции, используемые для экспериментов SAXS и EM, обозначены пунктирными линиями. ( D ) SEC на Superose 6 10/300 GL очищенных в градиенте сахарозы C1q, C1r ₂ s ₂ и комплекса C1.( E ) Экспериментальная кривая рассеяния (черная) в сравнении с кривой, рассчитанной (серая) для модели C1r ₂ s ₂ , показанной на рис. 3 D . ( F ) Распределение парных расстояний предполагает, что C1r ₂ s ₂ имеет протяженность 45 нм. ( G ) Экспериментальная кривая рассеяния (черная) по сравнению с кривой, рассчитанной (серая) по модели C1, показанной на фиг. 4 C . ( H ) Распределение парных расстояний предполагает, что длина C1 составляет 37 нм.

Рис. 3. Моделирование твердого тела

SAXS и отрицательная окраска EM предполагают сильно вытянутую структуру C1r ₂ s ₂ . ( A ) Схематическое изображение доменов внутри C1r ₂ s ₂ . ( B ) Стартовая модель тетрамера C1r ₂ s ₂ для доработки жесткого тела. ( C ) Все 43 конструкции, полученные из твердого тела, изогнуты, но имеют примерно равную вероятность изгиба в противоположных направлениях относительно центральной плоскости.( D ) Жесткая конструкция с наилучшим соответствием данным. ( E ) Отрицательная окраска EM тетрамера C1r ₂ s ₂ . Верхний показывает восемь выбранных средних значений класса C1r ₂ s ₂ . Комплекс имеет удлиненную форму с центральным расширением и небольшими глобулярными доменами, выступающими на периферии комплекса. Нижний показывает расчетные изображения проекции модели SAXS из D с использованием того же масштабирования, что и для средних значений класса.Для каждого среднего класса вручную назначалось аналогичное проекционное изображение. (Масштабные полосы: D , 5 нм; E , 50 нм.)

Рис. S1.

SAXS-анализ C1r ₂ s ₂ . ( A ) График Гинье объединенных данных C1r ₂ s ₂ . Остаточный график показан на Справа . ( B ) График Кратки данных предполагает, что C1r ₂ s ₂ является жесткой и сильно свернутой молекулой. ( C ) Схематическое изображение в том же стиле, что и на рис.3 A , описывающий процесс создания стартовой модели C1r ₂ s ₂ . Указываются записи PDB, используемые для различных шагов, как описано в методах SI . ( D ) Альтернативная входная модель, в которой молекула C1r транслируется на 27 Å по горизонтали по сравнению с входной моделью, показанной на рис. 3 B . Внизу наложены выходные модели из 10 доработок твердого тела. ( E ) То же, что и в C , но с переводом 54 Å.

Мы не знаем, как тандем C1r-доменов CUB1-EGF взаимодействует с их эквивалентом C1s в ядре тетрамера, и C1r ₂ s ₂ может иметь другую структуру в растворе, чем в качестве компонента комплекса C1. . Поэтому мы также исследовали две альтернативные модели тетрамера, в которых C1r транслировался на 27 Å и 54 Å (рис. S1 D и E ) в плоскости, определяемой димером C1s CUB1-EGF, по сравнению с первой исходной моделью, где Структура C1r-C1s CUB1-EGF была основана на тетрамере C1s CUB1-EGF, образованном кристаллической упаковкой (3).Уточнение твердого тела дало средние значения χ ² 1,68 ± 0,04 и 1,34 ± 0,16 для 27 и 54 Å трансляции C1r соответственно для 10 прогонов CORAL в каждом случае. Следовательно, с точки зрения подгонки экспериментальных данных обе модели с трансляцией C1r были лучше, чем модели, полученные из нетранслированной исходной модели. Однако полученные ансамбли моделей были структурно более разнообразными, что, возможно, отражает то, что точки шарнира C1r располагались дальше от центра молекулы и часто приводили к скрученным тетрамерам (рис.S1 D и E ). Расположение сайтов связывания коллагена в доменах CUB также оказалось плохо совместимым со связыванием C1q. Тем не менее, широкое разделение областей SP было аналогично выходным моделям, полученным из нетранслируемой исходной модели. В целом, исследования раствора C1r ₂ s ₂ показывают, что SP-домены двух молекул C1r широко разделены в тетрамере.

Чтобы подтвердить наш анализ SAXS, мы выполнили одночастичную электронную микроскопию на C1r ₂ s ₂ .Мы записали негативные изображения пятен комплекса C1r ₂ s ₂ в условиях низкого напряжения (60 кВ) для достижения оптимального контраста. Кроме того, мы выбрали области образца с типичным внешним видом одного углеродного слоя, чтобы избежать эффекта сплющивания от дополнительных углеродных пленок, покрывающих частицы, которые могут повлиять на кажущийся размер. Мы вычислили средние по классам набора данных частиц со в среднем 34 изображениями на класс, используя методы несмещенной кластеризации, независимо от какой-либо модели на основе SAXS (рис.3 E , верхний ). Кластеризация увеличивает отношение сигнал / шум и служит статистическим инструментом, который позволяет отображать повторяющиеся представления частиц. Все средние значения по классу показывают частицы с удлиненной формой и средним максимальным размером приблизительно 43 нм в соответствии с D _max 45 нм, наблюдаемым методом SAXS. Частицы демонстрируют центральное расширение и небольшие периферические домены, выступающие из комплекса.

Чтобы сравнить данные EM с моделью SAXS, мы сгенерировали карту плотности на основе репрезентативной атомной модели, полученной из SAXS, используя ту же выборку, что и для изображений EM, и вычислили проекционные изображения из этой карты, чтобы проиллюстрировать, как структура SAXS будет появляются в ЭМ под разными углами зрения.Для сравнения между EM и SAXS мы вручную присвоили вычисленную проекцию каждому среднему классу (рис. 3 E , Lower ). Сравнение показывает, что полученная методом МУРР модель имеет ту же форму и габаритные размеры, что и частицы, полученные с помощью ЭМ. В целом, модели SAXS и EM появляются в соответствии друг с другом до наложенной двойной симметрии в модели SAXS, то есть некоторые средние значения класса EM предполагают отклонение от идеальной двойной симметрии, в частности, во внешних выступах.

C1 — полая частица с SP-доменами, направленными от ядра.

Затем мы исследовали структуру раствора неактивированного C1 с SAXS. C1 собирали путем смешивания C1q, очищенного из плазмы, с очищенным рекомбинантным C1r ₂ (S / A) s ₂ (S / A) тетрамером (рис. 2 A и B ), в котором как C1r, так и C1s были неактивен, потому что серин в каталитической триаде мутировал в аланин. Мы использовали центрифугирование в градиенте сахарозы для отделения восстановленного C1 от несвязанного C1r ₂ s ₂ (рис.2 С ). Данные SAXS регистрировали в режиме реального времени сразу после элюирования C1 из колонки для эксклюзионной хроматографии (SEC). Такой подход позволил нам отделить небольшое количество олигомерного C1 от мономерного C1. Мы выбрали кривые рассеяния от центра пика элюирования для объединения, чтобы оптимизировать отношение сигнал-шум и минимизировать возможный вклад от несвязанных C1q и C1r ₂ (S / A) s ₂ (S / A), элюируемых после комплекс С1. Кроме того, стабильное значение радиуса инерции R _g (рис.S2 A ) выступал против значительной диссоциации C1 в части пика с поздним элюированием, и, что интересно, значение C1 R _g было меньше, чем наблюдаемое для C1rs и C1q (рис. S2 A и S3 и таблица S1). График Гинье данных C1 был линейным (рис. S2 B ), и для последующего анализа данных мы использовали данные с q <2,5 нм ^-1 . График Кратки данных свидетельствует о том, что C1 является многодоменным белком с несколькими хорошо сложенными доменами с некоторой гибкостью (рис.S2 C ). Моделирование ab initio дало модель, имеющую полую форму, похожую на седло, которая несовместима с плотно упакованным ядром, в котором домены протеаз C1r и C1s плотно упакованы в центре C1 (рис. S2 D ).

Рис. S2.

SAXS-анализ комплекса C1. ( A ) Прямое рассеяние и R _g встроенных данных SAXS для C1 нанесены на график в зависимости от объема элюирования. Серая область отмечает объем, соответствующий кадрам, используемым для дальнейшей обработки.( B ) Линейный график Гинье, рассчитанный на основе встроенных данных SAXS, не показывает никаких признаков агрегации C1 или межмолекулярного отталкивания. Остаточный график показан на Справа . ( C ) График Кратки данных предполагает, что C1 в основном жесткий, но с некоторой внутренней гибкостью. ( D ) Усредненная модель C1 на основе 100 ab initio моделей, рассчитанных с помощью DAMMIN. ( E ) Пример выходной модели твердого тела, в которой фрагменты CCP1-CCP2-SP направлены вверх по сравнению с центральной плоскостью комплекса.

Рис. S3.

SAXS-анализ C1q. ( A ) Данные по рассеянию C1q представлены как I ( q ) в логарифмической шкале относительно q . ( B ) График Гинье, рассчитанный на основе данных SAXS. Остаточный график показан на Справа . ( C ) Функция распределения парных расстояний для C1q, указывающая на частицу с D _max , приближающуюся к 45 нм. ( D ) График Кратки для C1q предполагает, что C1q в основном жесткий, но с некоторой гибкостью внутри молекулы.

Таблица S1.

Ключевые статистические данные и программное обеспечение, используемое для сбора, обработки, анализа и уточнения данных SAXS

Чтобы выяснить структурное расположение областей внутри C1, мы выполнили моделирование твердого тела, предполагая, что центральная двойная ось проходит параллельно оси N. -концевой сегмент коллагеновой ножки C1q. Мы начали с той же модели тетрамера, что и для C1r ₂ s ₂ , за исключением того, что домен SP образовал единое твердое тело вместе с доменами CCP как для C1r, так и для C1s, а гликаны были опущены для уменьшения вычислительной сложности.Коллагеновые стержни C1q были ограничены доменами CUB C1r ₂ s ₂ (фиг. 4 A ). Общим для всех результирующих моделей, полученных с помощью уточнения твердого тела, было полое ядро, которое также наблюдалось при реконструкции ab-initio, с протеазными доменами C1r и C1s, выступающими от ядра. Пятьдесят моделей были разделены на две группы в соответствии с их соответствием экспериментальным данным. В первую группу вошли 44 модели с χ ² = 2,38 ± 0,050, тогда как остальные 6 моделей имели χ ² = 2.6 ± 0,082. В основной группе наблюдался явный поворот тетрамера по сравнению с плоской стартовой моделью тетрамера C1r ₂ s ₂ (рис. 4 B и C ). Обычно домены протеазы вытягиваются, образуя более длинные и тонкие частицы, перпендикулярные оси симметрии второго порядка по сравнению с исходной моделью. В некоторых моделях протеазные домены C1s и C1r направлены вверх по направлению к N-концевому коллагеновому стержню C1q (Fig. S2 E ).В 4 из 44 моделей протеазные домены занимают ту же общую площадь, что и глобулярные головки C1q. В этих моделях наблюдается сдвиг вверх двух или более глобулярных головок, чтобы компенсировать SP домены C1r ₂ s ₂ , так что массовое распределение между gC1q и SP доменами примерно сохраняется.

Рис. 4.

SP-домены в неактивированном C1 расположены на периферии молекулы. ( A ) Схематическое изображение доменной структуры молекулы C1 и ограничений, налагаемых во время уточнения твердого тела по данным МУРР.( B ) Входная модель для уточнения. ( C ) Типичная выходная модель со всеми четырьмя доменами SP, расположенными на периферии C1r ₂ s ₂ , расположенных в центральной плоскости C1. ( D ) Средние по классу комплекса С1, полученного с помощью отрицательного окрашивания ЕМ. Типичные средние значения классов показывают 8–10 выступающих глобулярных доменов, расположенных вокруг сети центральных плотностей. Предварительно назначенные глобулярные головки C1q помечены буквой «g», а ориентировочные центры C1q — буквой «h».”( E ) Крио-ЭМ комплекса С1. Столбцы 1 и 3 показывают средние значения криогенного класса для образца, а столбцы 2 и 4 — вычисленные проекционные изображения модели SAXS. Каждому среднему классу вручную назначается проекционное изображение с аналогичным контуром. Несмотря на более сильное размытие, вызванное дефокусом, все еще можно различить от шести до девяти выступающих глобулярных доменов, и имеется хорошее общее согласие модели SAXS с данными крио-ЭМ. (Масштабные полосы: C , 5 нм; E , 50 нм.)

Небольшая группа моделей выпуска гораздо более разнородна, но в целом наблюдаются одни и те же особенности. Мы наблюдаем ту же ориентацию SP-доменов, где они могут быть либо в центральной плоскости, направленными вверх, но никогда не упаковываться внутри центральной пустоты, ограниченной коллагеновыми стержнями, глобулярными головками C1q и доменами CUB1-EGF C1r. ₂ с ₂ . Чтобы подтвердить, что входная модель не повлияла на наши результаты, мы провели еще 50 уточнений твердого тела, в которых домены CCP C1r и домен SP были свернуты в ядро ​​C1, аналогично преобладающей модели зимогена C1r (10), с незначительными изменениями. регулировки из-за геометрических ограничений (рис.S4 A ). Во всех результирующих выходных моделях с твердым телом домены C1r CCP1-CCP2-SP отклонились от ядра в точку, противоположную ядру, как это видно с первой входной моделью (рис. S4 B ).

Рис. S4.

Уточнение твердого тела C1, начиная с фрагмента C1r CCP1-CCP2-SP, помещенного внутри центральной полости. ( A ) Входная модель для уточнения с фрагментами C1r CCP1-CCP2-SP, помещенными внутри центральной полости. ( B ) Типичная выходная модель со всеми четырьмя доменами SP, расположенными на периферии C1r ₂ s ₂ , расположенных в центральной плоскости C1, показывая, что конформация C1r во входной модели не оказывала существенного смещения на выходные модели. при доработке твердого тела.

Мы также записали негативные изображения пятен молекул C1 в тех же условиях, что и для C1r ₂ s ₂ . Опять же, мы выбрали области образца с типичным внешним видом одного углеродного слоя, чтобы избежать эффекта сглаживания. Мы сгруппировали результирующий набор данных в среднем по 28 изображений для каждого класса, используя объективные методы кластеризации, независимо от какой-либо модели SAXS. Полученные средние значения по классу показывают максимальные размеры 32–36 нм (рис. 4 D ), что немного ниже, чем у D _max , полученного с помощью SAXS.Согласно преобладающим представлениям, 8–10 глобулярных доменов расположены вокруг центральной сети плотностей. Центральные части отрицательно окрашенных средних классов выглядят довольно темными, что может быть объяснено накоплением пятен ионов тяжелых металлов в этой области. Это конкретное поведение окрашивания, таким образом, согласуется с довольно полой структурой частицы, как предполагают как моделирование методом SAXS ab-initio, так и моделирование твердого тела.

При сравнении средних значений класса EM с репрезентативной моделью SAXS комплекса C1, модель SAXS предсказывает до 10 глобулярных доменов, которые выступают из ножки C1 на видах сверху / снизу C1.Кроме того, модель SAXS предсказывает виды сбоку, где ступица C1q рассматривается как одна из выступающих областей (сравните Рис. 4 C , Левый , например, с верхним выступом, обозначенным «h» на Рис. 4 D ). Среднее значение класса ЭМ с 10 отдельными шаровидными выступами показано в строке 3, вид 3 на рис. 4 D . Тем не менее, большинство средних значений по классам показывает от восьми до девяти различимых периферийных областей. Для интерпретации видов с менее чем 10 выступающими доменами важно отметить, что в некоторых проекционных видах некоторые домены могут накладываться друг на друга и, таким образом, маскироваться в средних значениях класса.

Мы интерпретировали средние по классам, где все выступающие домены выглядели как небольшие округлые плотности в виде сверху / снизу (Рис. 4 D ), что означает, что центральные плотности могут представлять собой перекрытия концентратора C1q с центральными частями C1r ₂ с ₂ . Частое появление видов сверху / снизу можно объяснить предпочтительным связыванием глобулярных доменов C1q с углеродной пленкой. Расстояния между глобулярными доменами, по-видимому, несколько изменчивы, что указывает на определенную степень конформационной изменчивости.Такая изменчивость не отражена в моделях SAXS, где была наложена двойная симметрия, чтобы минимизировать количество твердых тел, чтобы уменьшить переобучение и вычислительную сложность.

Хотя уровень детализации не позволяет различать головные домены C1q и домены C1r ₂ s ₂ SP, средние значения классов, полученные нами для C1 при отрицательном окрашивании, сильно противоречат компактной конформации C1r ₂ s ₂ в комплексе. Такая компактная конформация C1 приведет к появлению проекционных видов, показывающих до шести выступающих доменов, в зависимости от угла обзора и степени наложения (2).Более того, противоположные глобулярные домены обычно были разделены прогнозируемым расстоянием по крайней мере 29 нм, что также свидетельствует в пользу довольно большого расстояния между C1r ₂ s ₂ SP доменами в комплексе C1.

Для дальнейшего исследования указанной модели C1 мы также выполнили нативную крио-ЭМ (рис. 4 E , столбцы 1 и 3). Особая проблема заключалась в низком контрасте комплекса C1 в криогенных условиях, что можно объяснить крайне разреженной плотностью белка в этом комплексе, поскольку масса всего 774 кДа распределена в сфере диаметром 38 нм.Для сравнения, комплекс C1 более чем на 50% больше прокариотической рибосомы по размеру, но содержит только ∼1 / 3 ее массы. Мы использовали сильно разбавленные образцы C1, чтобы свести к минимуму агрегацию, в результате чего на одну экспозицию приходилось примерно 1–10 частиц. Средние значения крио-класса (рис. 4 E ) составляют 65 изображений на класс. Поскольку криоизображения получают при более высокой расфокусировке по сравнению с отрицательно окрашенными частицами, наблюдается несколько большее размытие, что, в свою очередь, означает, что отдельные глобулярные домены могут казаться наложенными.Тем не менее, мы смогли различить от шести до девяти выступающих доменов в большинстве средних по классам (рис. 4 E , столбцы 1 и 3). Более того, угловое распределение изображений оказалось более равномерным, чем в данных с отрицательными пятнами, что привело к среднему диаметру ~ 38 нм в средних значениях криокласса. Что касается комплекса C1r ₂ s ₂ , мы преобразовали репрезентативную модель C1 SAXS в карту плотности с одинаковым масштабом и рассчитали проекции под разными углами обзора (рис.4 E , столбцы 2 и 4). Опять же, вычисленный прогноз был вручную назначен каждому среднему классу. В этом сравнении можно увидеть, что имеется хорошее общее согласие в общих чертах средних по классам и назначенных прогнозах SAXS. Однако точное положение отдельных глобулярных доменов может варьироваться между средними значениями класса EM и единственной моделью SAXS, используемой здесь для проекции. Эти несоответствия могут возникать из-за структурной неоднородности C1, а индивидуальная гибкость компонентов C1q и C1r ₂ s ₂ может привести к значительному отклонению от двойной симметрии, принятой для моделирования твердого тела SAXS.Такая конформационная гибкость хорошо согласуется с вариациями, обнаруженными между различными моделями SAXS, которые мы вычислили, как описано выше.

Обсуждение

Структурные данные, представленные здесь, противоречат общепринятой структуре комплекса C1, где тетрамерный C1r ₂ s ₂ свернут внутри стеблей C1q. Автоактивация, происходящая между двумя молекулами C1r, заключенными в одну молекулу C1, кажется невозможной из-за разделения их SP-доменов, которые мы наблюдаем для неактивированного C1 как в растворе, так и в электронной микроскопии.Мы также наблюдаем, что несвязанный C1r ₂ s ₂ является сильно вытянутым, что еще раз свидетельствует против компактной конформации C1r ₂ s ₂ , когда-то связанной внутри C1. Самым простым решением загадки активации, по-видимому, является то, что зимоген C1r в одном комплексе C1 активируется с помощью C1r в соседнем комплексе C1. Наше исследование не позволяет исключить, что C1r активирует соседний зимоген C1s в той же молекуле C1. На обоих концах тетрамера протеазы SP-домены одного C1r и одного C1s будут присутствовать рядом друг с другом.Однако периферическое расположение активного сайта на дальнем конце домена SP C1r оказывается лучше совместимым с активацией C1s в соседней молекуле C1 по сравнению с активацией C1s, принадлежащих той же молекуле C1. Для решения этого вопроса, вероятно, потребуются сложные кинетические исследования с использованием нескольких вариантов C1r и C1s и модельной системы, в которой обмен C1r и C1s между тетрамерами находится под строгим контролем.

Поскольку первая стадия активации C1 является межкомплексной реакцией, основная роль активатора заключается в том, что он объединяет молекулы C1 и ориентирует SP-домены в соседних молекулах C1 примерно в плоскости, обеспечивая активацию между C1.Этот механизм был бы похож на тот, который мы показали для лектинового пути (11). Это предположение также согласуется с выводом о том, что gC1q-специфическое mAb и его фрагмент F (ab ‘) ₂ способны активировать C1 в жидкой фазе посредством агрегации C1q (13). Кроме того, подтверждая, что связывание C1 в правильной ориентации при определенной плотности достаточно для активации CP, фрагменты биспецифических антител, диатела фрагментов scFv, специфичных для gC1q и лизоцима, были способны нацеливать C1 на покрытые лизоцимом эритроциты и вызывать их лизис (14 ).Оба результата, по-видимому, совместимы с моделью межкомплексной активации, а не с внутрикомплексной активацией.

Постоянно растущий список природных активаторов CP также является сильным аргументом в пользу механизма межкомплексной активации. Связывание C1q в основном регулируется электростатическим взаимодействием между gC1q и более чем 100 установленными лигандами (15). Не все способны активировать комплемент, но структурно неродственные лиганды, такие как IgG / IgM, C-реактивный белок, gC1qR и ассоциированные с болезнью Альцгеймера олигомеры Aβ, и многие другие, активируют классический путь (16).Преобладающая модель внутрикомплексной активации довольно сложна механически и ее трудно согласовать с таким большим количеством разнообразных активаторов.

Преобладающая модель для комплекса C1 основана на более ранних отрицательных исследованиях ЭМ окрашивания C1 и C1r ₂ s ₂ , взаимодействия C1r – C1r, наблюдаемые в упаковке кристаллов (2, 9, 10) и масс-спектрометрическом анализе ( 5). Эта модель предполагает, что CCP1-CCP2-SP домены C1r и C1s плотно упаковываются в центре C1. Также предполагается, что активация C1 является внутримолекулярной реакцией, вызываемой конформационными изменениями, распространяющимися через стебли коллагена C1q при связывании активатора.Помимо наших структурных исследований, представленных здесь, есть дополнительные аргументы против преобладающей модели: во-первых, насколько нам известно, нет прямых экспериментальных данных, показывающих, что связывание активатора вызывает конформационные изменения в стеблях коллагена C1q. Во-вторых, взаимодействия упаковки кристаллов между двумя фрагментами C1r CCP1-CCP2-SP, в которых домен SP одной молекулы контактирует с доменом CCP1 во второй, как предполагается, отражают взаимодействия C1r – C1r в неактивированном C1 (2, 9, 10). Однако важность контакта с кристаллами in vivo никогда не подтверждалась мутациями в C1r.В-третьих, предполагаемая компактная конформация C1, лежащая в основе преобладающей модели, никогда не наблюдалась однозначно другими (2). В-четвертых, для активации C1q-связанного C1r необходимы домены C1s CUB1-EGF-CUB2, но не домены C1s CCP1-CCP2-SP (17, 18). Этот результат был бы странным, если бы домены C1s и их эквиваленты C1r были плотно упакованы в центре комплекса C1, но он легко совместим с доменами C1r и C1s SP, отходящими от центра. В-пятых, предполагаемая компактная конформация C1 также потребует, чтобы домен C1r CUB2 принял сильно изогнутую или частично развернутую конформацию, чтобы одновременно взаимодействовать с коллагеновым стержнем C1q и позволить доменам CCP1-CCP2-SP располагаться в ядре C1.В-шестых, масс-спектрометрическое количественное определение доступности лизина в C1r ₂ s ₂ в качестве свободного тетрамера по сравнению с включением в C1 предположило, что некоторые лизины в домене C1s SP защищены при включении в C1, что было воспринято как доказательство в поддержку компактной модели C1, лежащей в основе внутримолекулярной активации (5). Однако это различие также может быть связано с введением тетрамера в C1, что, скорее всего, изменит динамические свойства C1s и его SP-домена и, по-видимому, также приведет к более компактной организации тетрамера, как показано нижним D _max значение для C1 по сравнению со свободным тетрамером.

Наши результаты не исключают конформационного изменения C1 при связывании активатора. Такое изменение может фактически изменить как доступность, так и конформацию доменов C1r ₂ s ₂ SP и способствовать межкомплексной активации. Решающее различие между преобладающей моделью и моделью, которую мы представляем, заключается в конформации неактивированного C1 в жидкой фазе. Наши структурные исследования проводились с помощью двух дополнительных методов, один из которых, SAXS, непосредственно касается конформации жидкой фазы.Эти исследования показывают, что C1r ₂ s ₂ , как несвязанный, так и присутствующий в неактивированном C1, является удлиненным, а не компактным по отношению к доменам SP. Недавние исследования крио-ЭМ томографии C1, связанного с гексамерной платформой IgG, вероятно, представляют активированное состояние C1. Здесь также предполагается, что домены C1r ₂ s ₂ CCP1-CCP2-SP выступают из центра молекулы C1 (19).

Очевидной стратегией различения межмолекулярной и внутримолекулярной активации C1 является исследование кинетики реакции.Тетрамер C1r ₂ s ₂ дикого типа может медленно активироваться спонтанно, но активация ускоряется за счет образования комплекса C1, и быстрая активация происходит при связывании с иммунными комплексами, содержащими IgG (17, 20). Кинетика активации C1 чрезвычайно сложна, поскольку она включает связывание C1 с активатором, автоактивацию C1r и последующую активацию C1s с помощью C1r, возможно, сопровождаемую конформационными изменениями в сложном комплексе C1. Упрощенная модель предполагает, что преобразование неактивированного C1 в активированный C1 имеет один общий этап ограничения скорости.Одно исследование в пользу внутримолекулярной активации C1 поддерживает кинетику первого порядка для спонтанной активации C1 в растворе в отсутствие активатора с t _1/2 4 и 7 минут при 37 и 30 ° C, соответственно ( 21). Здесь C1 был восстановлен из субъединиц, полученных из сыворотки. Однако другое исследование не показало измеримой активации жидкой фазы восстановленного C1 через 20 минут, если не присутствовали значительные количества олигомеров или мономеров IgG (22). Третье исследование с использованием агрегатов антиген-антитело в качестве активатора также показало слабую активацию восстановленного C1 в отсутствие иммунных комплексов (17).Четвертое исследование с использованием C1, очищенного непосредственно из свежей плазмы, показало только медленную активацию в отсутствие иммунного комплекса (23). Позже было высказано предположение, что небольшие количества загрязняющих активных протеаз (включая активированные C1 и C1r) могут вносить вклад в очевидную активацию C1 первого порядка (24, 25). В целом, существующие кинетические данные по активации C1 не могут различить две модели активации.

В заключение, наши структурные исследования показывают, что первая стадия активации C1 включает отщепление зимогена C1r в одном комплексе C1 с помощью C1r из соседнего комплекса C1, в то время как дополнительные данные необходимы, чтобы решить, происходит ли активация C1s с помощью C1r также между комплексами C1.Наши результаты привели нас к предложению универсальной модели активации, происходящей через родственный лектин и классический путь комплемента. Выяснение структуры и функции важно для будущего дизайна терапевтических стратегий вмешательства, направленных на стимуляцию или ингибирование активации комплемента. Комплемент-зависимые антитела, индуцирующие цитотоксичность, используемые в терапии рака, основаны на том, что их сегмент Fc организован в олигомеры, с которыми может связываться C1, и усиление нацеливания C1 на раковые клетки является проверенной стратегией (26).В сочетании с вышеупомянутыми существующими экспериментальными данными, показывающими, что привязки C1 к мишени достаточно для индукции активации CP, наши результаты подтверждают, что IgG-независимое нацеливание C1 на раковые клетки или патогены является жизнеспособной стратегией.

Методы

C1q очищали из плазмы, тогда как рекомбинантный C1r ₂ s ₂ , оба несущие мутации S / A в обеих протеазах, экспрессировались в клетках HEK293-F. Восстановленный комплекс C1 очищали ультрацентрифугированием в градиенте сахарозы.Данные SAXS для C1r ₂ s ₂ и C1q были собраны в пакетном режиме на ESRF BM29, тогда как данные SAXS на линии Superose 6 SEC для комплекса C1 были собраны на Petra P12. Начальные модели для твердотельного уточнения C1r ₂ s ₂ и C1 были построены на основе доступных подструктур, доступных в банке данных о белках Исследовательского сотрудничества в области структурной биоинформатики. Для подготовки образцов EM с отрицательным окрашиванием для C1r ₂ s ₂ использовали фракцию пика из колонки SEC Superdex 200, тогда как для C1 комплекс сначала очищали центрифугированием в градиенте сахарозы, а затем SEC на Superose 6. столбец.Сетки получали на микроскопе Tecnai T12. Для крио-ЭМ анализа C1 очищали градиентом сахарозы и SEC, разбавляли и адсорбировали на сплошной углеродной пленке. После замораживания в жидком этане образцы визуализировали на Titan Krios EM (FEI), оборудованном камерой Gatan US4000, работающей при 200 кВ. Полные экспериментальные детали представлены в SI Methods .

SI Методы

Экспрессия и очистка белков.

Гены в соответствии с последовательностью для C1r (NM_001733.4) и C1s (NM_201442.2) были синтезированы GenScript Inc. USA. Синтезированные гены клонировали в вектор pcDNA3.1 / myc-His (-) A (Invitrogen) с использованием сайтов рестрикции EcoRI / XbaI. Неактивные C1r и C1s были получены путем мутации активного серина каталитической триады в C1r (S637A) и C1s (S632A). Линию клеток эмбриональной почки человека HEK293-F (Invitrogen) использовали для временной экспрессии рекомбинантных неактивных версий C1r и C1s. Клетки HEK293-F выращивали в среде, не содержащей белков (FreeStyle 293 Expression Medium; Gibco), при перемешивании при 37 ° C и 8% CO ₂ .Трансфекцию проводили с использованием PEI (25 кДа; Polysciences) в качестве реагента для трансфекции в соотношении PEI: ДНК 3: 1. После трансфекции клетки выращивали в течение 4–5 дней, а супернатанты собирали после центрифугирования.

C1 и C1r

₂ s ₂ Очистка для исследований SAXS.

Тетрамер C1r ₂ (S637A) C1s ₂ (S632A) очищали согласно Bally et al. (7), тогда как C1q был очищен из сыворотки согласно Tenner et al. (27). Для восстановления C1, C1q смешивали с молярным избытком C1r ₂ s ₂ и загружали в градиент сахарозы 10–30% (мас. / Об.) В 50 мМ EPPS (4- (2-гидроксиэтил) -1-пиперазинпропансульфоновая кислота). кислота) (pH 8.5), 145 мМ NaCl, 3 мМ CaCl ₂ и центрифугировали в роторе TH-660 (Sorvall, ThermoFisher Scientific) при 185,795 × г в течение 17 ч при 4 ° C. После ультрацентрифугирования фракции собирали со дна центрифужной пробирки с помощью перистальтического насоса и анализировали с помощью SDS-PAGE. Перед поточным SAXS-анализом C1 его диализовали против 50 мМ EPPS (pH 8,5), 145 мМ NaCl, 3 мМ CaCl ₂ и концентрировали непосредственно перед измерениями SAXS. C1r ₂ s ₂ и C1q очищали, как C1, в градиенте сахарозы 10–30% (мас. / Об.) В 50 мМ Tris⋅HCl (pH 7.4), 145 мМ NaCl, 3 мМ CaCl ₂ . Перед сбором данных SAXS образцы диализовали против 50 мМ Tris⋅HCl (pH 7,4), 145 мМ NaCl, 3 мМ CaCl ₂ и концентрировали непосредственно перед измерениями SAXS.

Сбор и обработка данных SAXS.

Данные для C1r ₂ s ₂ и C1q были собраны в пакетном режиме (в диапазоне от 1,0 до 6,8 мг / мл) на канале ESRF BM29 с использованием пиксельного детектора PILATUS 1M и λ = 0,992 Å при температуре -контролируемый капилляр при 4 ° C.Расстояние от образца до детектора составляло 2,867 м, охватывая диапазон передачи импульса 0,004 < с <0,5 Å ⁻¹ [ q = (4 × π × sin θ) ÷ λ, где 2θ — угол рассеяния]. Для комплекса С1 проводную эксклюзионную хроматографию методом SAXS проводили на канале PETRA III / EMBL P12 с использованием колонки Superose 6 10/300 GL, уравновешенной 50 мМ EPPS (pH 8,5), 145 мМ NaCl, 3 мМ CaCl. ₂ . Скорость потока составляла 0,3 мл / мин. Данные регистрировали при 20 ° C с использованием пиксельного детектора PILATUS 2M (DECTRIS) и λ = 1.240 Å. Расстояние от образца до детектора составляло 3,0 м, покрывая 0,002 < с <0,48 Å ^-1 . Каждый кадр охватывает экспозицию продолжительностью 0,995 с, выполняемую каждую секунду во время прогона SEC. Нормализация и радиальное усреднение проводились на канале пучка с помощью автоматизированного трубопровода (28, 29). Обработку данных для получения сокращенного профиля рассеяния с вычитанием из буфера проводили с помощью следующих стандартных методов (30). Фоновые данные и данные C1 были получены для кадров 3800–3900 и 1851–1950 соответственно.

Моделирование SAXS Ab Initio и уточнение твердого тела.

В тетрамере C1r ₂ s ₂ две молекулы C1s расположены по центру с одной молекулой C1r снаружи каждой молекулы C1s (2, 3). Входная модель для CORAL усовершенствования тетрамера C1r ₂ s ₂ была построена в три этапа (рис. S1 C ). Во-первых, фрагменты CCP1-CCP2-SP были сконструированы путем комбинации структур зимогена C1r (коды PDB ID 1GPZ и 1MD7), тогда как для зимогена C1s использовали код 4J1Y.Во-вторых, тетрамер CUB1-EGF был сконструирован на основе тетрамера кристаллической упаковки в структуре фрагмента C1s CUB1-EGF-CUB2 (идентификационный код 4LMF), предложенного для представления возможной модели для C1r ₂ s ₂ CUB1- Тетрамер EGF (3). Домены C1r CUB1 и CUB2 были смоделированы с помощью phenix.sculptor (31), исходя из структуры Ca ²⁺ , связанного с C1s CUB1-EGF-CUB2 (ID-код 4LOR). Затем эти модели были объединены со структурой домена C1r EGF (идентификационный код 1APQ).В идентификационном коде 4LMF домен CUB2 изгибается из плоскости тетрамера CUB1-EGF. Мы смоделировали приблизительную ориентацию в плоскости доменов CUB2 C1r и C1s по сравнению со структурой MAP-1 (ID-код 4AQB), которая лучше совместима с одновременным связыванием коллагеновых стержней с доменами CUB1 и CUB2. На третьем этапе модель тетрамера C1r ₂ s ₂ была дополнена комбинацией тетрамера CUB1-EGF-CUB2 с фрагментами CCP1-CCP2-SP C1r и C1s с использованием структуры C1s CUB2-CCP1- Фрагмент CCP2 (идентификационный код 4LOT) в качестве ориентира.Наконец, меньшие отсутствующие области в этой модели тетрамера были смоделированы вручную в программе «O» (32), и два Asn-связанных гликана на C1s и четыре на C1r были смоделированы, как описано (33). Однако, поскольку пространственное соотношение между доменами C1r CUB1-EGF и соответствующими доменами из C1s неизвестно, мы также построили две альтернативные стартовые модели с 27 и 54 Å трансляциями в плоскости C1r относительно фиксированного C1s (рис. S1 D и E ).

Каркас и β-атомы углерода стеблей коллагена C1q были смоделированы с использованием интерактивного скрипта построения коллагена Triple-Helical (THe BuScr) (34).Коллагеновый стержень C1q моделировали в виде двух отдельных частей, причем один фрагмент состоял из аминокислот до перегиба, а другой — из аминокислот после перегиба. Цепи были смоделированы с глицином цепи A, водородным связыванием со следующей аминокислотой в трипептидной единице в цепи C, глицином цепи C водородной связью с цепью B и глицином цепи B водородной связью с цепью A, как описано в исх. 4. Полноатомная модель была получена из основной цепи и модели β-углерода с использованием библиотеки ротамеров боковой цепи (35) с последующим добавлением гидроксипролинов с THe BuScr.В последней модели коллагенового стержня C1q коллагеновый стержень после перегиба был добавлен в виде двух отдельных частей, чтобы обеспечить лучшую сольватацию в CORALXL. Изгиб не моделировался в деталях, вместо этого две части C1q удерживались вместе двумя ограничителями расстояния, чтобы обеспечить гибкость угла между двумя стержнями. Наконец, полная молекула C1 была собрана путем размещения остатков лизина в стеблях коллагена C1q, которые, как известно, важны для взаимодействия, рядом с сайтами кальция в доменах CUB1 и CUB2 в доменах C1r и CUB1 C1s (7), чтобы установить начальную геометрию для взаимодействия. между стержнем коллагена и доменами CUB, как это наблюдается в ID-кодах 4LOR (C1s CUB1-коллаген) и 3POB (MASP-1 CUB2-коллаген).Использовалась только модель тетрамера C1r ₂ s ₂ с трансляцией C1r 0 Å, поскольку для последующего размещения коллагеновых стержней на домены CUB в двух моделях с трансляциями C1r было обнаружено, что требуется плотная кластеризация коллагеновых стержней. на противоположных концах тетрамера CUB1-EGF-CUB2.

Уточнения твердого тела были выполнены с использованием диапазона данных в диапазоне с <0,25 Å ^-1 с CORALXL, заказной версией CORAL (36), допускающей 30 твердых тел и 1000 ограничений расстояния, составленных Maxim. Петухов на ЕМБЛ в Гамбурге.Была применена операция двойной симметрии с использованием симметрии P2 к входным моделям, чтобы минимизировать количество твердых тел. Ограничения расстояния использовались для поддержания границы раздела между связанными с симметрией доменами C1s CUB1-EGF поперек оси двойного вращения. Для C1r ₂ s ₂ было применено три ограничения расстояния, тогда как для C1 использовалось 28 ограничений. Несколько значений этих ограничений (связность и расстояние) были протестированы перед окончательными уточнениями и оценены на основе внутренней согласованности между полученными моделями и биологической значимости.Типичная выходная модель и данные, используемые для уточнения твердого тела, хранятся в SASBDB как для C1r ₂ s ₂ , так и для комплекса C1 (Таблица S1). Графики были подготовлены с помощью GraphPad Prism 5.03. Объем Porod определялся с помощью собственного программного обеспечения, написанного J.S.P. Выражение Гинье было подогнано к части данных low- q для определения I (0), а закон Порода I ( q ) ∝ q ⁻⁴ с добавленной константой был приспособлен к части high- q , чтобы определить константу, которую нужно вычесть из данных, чтобы они соответствовали закону Порода.Инвариант Порода был рассчитан путем численного интегрирования экспериментальных данных, умноженных на q ² с соответствующими экстраполяциями на q = 0 и q = ∞.

EM.

Для отрицательного окрашивания EM комплекса C1r ₂ s ₂ , фракция пика, полученная при эксклюзионной хроматографии на 24-мл колонке Superdex 200 (GE Healthcare), уравновешенной 10 мМ Hepes (pH 7,4), 150 мМ NaCl и 3 мМ CaCl ₂ разбавляли соответствующим образом.Пленку углерода, приготовленную на слюде, флотировали на свежеприготовленном образце в течение 2 мин, а сетки готовили по сэндвич-методу (37). Чтобы подготовить образцы C1 для отрицательной окраски EM и крио-EM, комплекс C1 подвергали центрифугированию в градиенте сахарозы, как описано выше для приготовления образца SAXS. Фракции, содержащие комплекс C1 (фиг. 2 C ), подвергали SEC на колонке Superose 6 10/300 GL, уравновешенной 50 мМ EPPS (pH 8,5), 145 мМ NaCl, 3 мМ CaCl ₂ и Пиковая фракция была получена в соответствии с сэндвич-методом для ЭМ с отрицательным окрашиванием.Сетки получали изображения на микроскопе Tecnai T12 (FEI / Thermo Fisher Scientific) при комнатной температуре и высоком напряжении 60 кВ на камеру Gatan Multiscan 794 CCD (Gatan) при номинальном увеличении 42000 ×, что давало размер пикселя 4,2 Å. на пиксель. Для C1r ₂ s ₂ использовалась расфокусировка от -1,5 до -2,1 мкм. В общей сложности 7,551 частицы были вручную отобраны из изображений, скорректированы на расфокусировку (38) и сгруппированы, как описано (12), в среднем по 34 изображениям на класс. Для комплекса C1 расфокусировка -1.От 2 до -1,4 мкм было выбрано 14 331 частицы и сгруппированы в среднем в 28 изображений на класс.

Для крио-ЭМ-анализа также использовался материал C1 из SEC. На сетку Quantifoil (Йена, Германия) 3,5 / 1 монтировалась сплошная углеродная пленка. Соответствующим образом разбавленный образец адсорбировали на сетке с тлеющим разрядом в течение 1 мин с последующим ручным блоттингом и замораживанием в жидком этане с использованием системы Leica EM CPC (Leica Microsystems). Образец был отображен в Titan Krios EM при 200 кВ (FEI), расфокусировке от -5 до -8 мкм и номинальном увеличении 59000 × на камере Gatan US4000, в результате чего конечный размер пикселя был равен 1.2 Å на пиксель. Поскольку комплекс C1qrs создает довольно низкий контраст в криогенных условиях, к изображениям был применен фильтр Винера нижних частот, и 12890 изображений были выбраны вручную. Изображения были сгруппированы в среднем по 65 изображений на класс.

Благодарности

Мы благодарим сотрудников компании Petra P12 и ESRF BM29 за поддержку во время сбора данных и, в частности, Сай Джеффриса за помощь с поточной обработкой данных и Максима Петухова за компиляцию CORALXL. Г.A. был поддержан Biostruct-X, Danscatt, Датским советом независимых исследований в области естественных наук и центром BRAINSTRUC фонда Lundbeck Foundation. S.T. был поддержан Датским советом независимых исследований в области медицинских наук и Ново-Северным фондом. Б.С. выражает признательность за финансирование Датского совета независимых исследований в области естественных наук.